Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CDKN2A/p16INK4a para WB, IF/ICC, ELISA - P42771

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDKN2A/p16INK4a

• O CDKN2A codifica o inibidor de quinase dependente de ciclina 2A, também conhecido como p16INK4a. É um supressor tumoral chave que regula negativamente a progressão do ciclo celular, inibindo CDK4 e CDK6, prevenindo a fosforilação da proteína do retinoblastoma e, assim, bloqueando a transição G1/S.
• O p16INK4a é um membro da família INK4 de inibidores de CDK e contém quatro motivos de repetição de anquirina essenciais para sua interação com as CDKs.
• A localização subcelular inclui tanto o citoplasma quanto o núcleo, refletindo seu papel dinâmico na regulação do ciclo celular.
• Amplamente expresso na maioria dos tecidos, mas notavelmente ausente no cérebro e músculo esquelético; uma isoforma específica do pâncreas (isoforma 3) foi identificada.
• Modificações pós-traducionais, como acetilação e fosforilação, modulam a estabilidade e função do p16INK4a.
• Alterações genéticas no CDKN2A estão ligadas a vários cânceres, incluindo melanoma e síndrome de Li-Fraumeni, ressaltando sua importância como supressor tumoral.
• A proteína tem um peso molecular previsto de aproximadamente 16,5 kDa (UniProt) e é detectada em torno de 17 kDa em condições experimentais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 57-156 do CDKN2A/p16INK4a humano, cobrindo uma região que inclui domínios chave de repetição de anquirina; portanto, é provável que reconheça a proteína nativa em múltiplas aplicações.
• Para Western blotting, é esperada uma banda em aproximadamente 17 kDa; considere usar lisados de linhagens celulares com expressão variável de p16INK4a ou controles de nocaute para confirmar a especificidade (o produto é validado por KO).
• Na imunofluorescência/ICC, espere marcação tanto nos compartimentos nuclear quanto citoplasmático; protocolos de fixação e permeabilização apropriados devem ser validados para o seu sistema de amostra específico.
• O desempenho no ELISA deve ser avaliado usando p16INK4a recombinante ou antígenos peptídicos; o anticorpo pode ser adequado para o desenvolvimento de imunoensaios sanduíche quando emparelhado com reagentes de captura e detecção apropriados.
• A reatividade cruzada foi demonstrada para o p16INK4a humano; a reatividade com outras espécies ou isoformas deve ser verificada experimentalmente, se necessário.

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