Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CDKN2A/p19ARF para WB, ELISA - Q64364

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: CDKN2A/p19ARF (Supressor tumoral ARF) Função e Localização

• O CDKN2A codifica duas proteínas distintas através de splicing alternativo: p16INK4a e p19ARF (o supressor tumoral ARF). A proteína p19ARF não está relacionada com a p16INK4a na sequência de aminoácidos.
• A p19ARF atua como um potente supressor tumoral, induzindo a paragem do ciclo celular nas fases G1 e G2. Referências relacionadas: PMID:8521522 PMID:9393858 PMID:15601844 PMID:17936562
• Liga-se à MDM2 e sequestra-a no nucléolo, bloqueando a degradação da p53 e melhorando a transativação dependente da p53 e a apoptose. Referências relacionadas: PMID:10359817 PMID:9529248
• A p19ARF também induz a paragem G2 e a apoptose de uma forma independente da p53, impedindo a ativação de complexos ciclina B1/CDC2. Referências relacionadas: PMID:15361884
• Regula negativamente a repressão transcricional induzida pela BCL6 através da ligação à BCL6. Referências relacionadas: PMID:15567177
• Localização subcelular: encontrada principalmente no nucléolo e nucleoplasma; existe uma isoforma mitocondrial de curta duração.
• A p19ARF está envolvida em funções nucleolares, como a inibição da biogénese dos ribossomas através da interação com a TTF1 e a promoção da degradação da NPM1. Referências relacionadas: PMID:20513429
• Funções adicionais incluem a regulação da sumoilação, interação com E2F1 e MYC, e um papel na autofagia e na morte celular independente de caspases.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético derivado dos aminoácidos 1-100 da p19ARF de mouse. O anticorpo provavelmente reconhece a região N-terminal da proteína.
• Para o Western blot (WB), teste o anticorpo em linhagens celulares de mouse conhecidas por expressarem p19ARF. O peso molecular previsto é de ~19 kDa, mas bandas adicionais podem aparecer devido a modificações pós-traducionais ou isoformas alternativas. Recomenda-se uma amostra de controlo positivo que expresse p19ARF.
• Para ELISA, o peptídeo de imunização pode servir como controlo positivo. Valide o ensaio com concentrações conhecidas do peptídeo para estabelecer curvas padrão.
• A reatividade cruzada do anticorpo é reportada para mouse. Se trabalhar com outras espécies, verifique experimentalmente a reatividade.
• É obrigatória a condição de envio em saco de gelo; armazene o anticorpo a -20°C ou conforme recomendado após o recebimento.

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