Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CEBPA para WB, IHC-P, ELISA - P49715

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CEBPA

• CEBPA (proteína alfa de ligação ao CCAAT/enhancer, também conhecida como C/EBP-alfa) é um fator de transcrição codificado pelo gene CEBPA, atuando como regulador principal da parada da proliferação e da diferenciação terminal em múltiplos tipos celulares, incluindo progenitores mieloides, adipócitos e hepatócitos.
• Ele se liga diretamente à sequência consenso de DNA 5'-T[TG]NNGNAA[TG]-3' e funciona como um ativador transcricional em genes alvo distintos. Referências relacionadas: PMID:11242107
• Durante a embriogênese inicial, CEBPA desempenha papéis essenciais e redundantes com o CEBPB, sendo fundamental para o desenvolvimento adequado do fígado e pulmão (por similaridade).
• No sistema hematopoiético, CEBPA é indispensável para a transição de progenitores mieloides comuns (CMP) para progenitores de granulócitos/monócitos (GMP), um passo chave na comprometimento da linhagem mieloide (por similaridade).
• Para impulsionar a diferenciação terminal de adipócitos e granulócitos, CEBPA regula negativamente os genes que mantêm um estado indiferenciado e proliferativo por meio da repressão de E2F1, um processo que requer interação funcional com o complexo de remodelação da cromatina SWI/SNF. Referências relacionadas: PMID:14660596
• A iniciação alternativa da tradução gera diferentes isoformas proteicas; a isoforma 2 atua como um regulador dominante negativo com atividade de transativação mais fraca e incapacidade de inibir a proliferação celular. Referências relacionadas: PMID:14660596
• CEBPA aumenta direta e especificamente a transcrição do DNA ribossomal por interação com cofatores específicos da RNA polimerase I e indução da acetilação de histonas, uma função associada à sua localização nucleolar.
• Ele se localiza predominantemente no núcleo e nucléolo, o que é consistente com seus papéis na regulação da transcrição de genes codificadores de proteínas e ribossomais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 111–180 do CEBPA humano) está localizado dentro do domínio de transativação e é altamente conservado entre humanos, camundongos e ratos, o que sustenta a reatividade cruzada observada. Recomenda-se validar a reatividade no seu sistema de amostras.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda principal próxima a 38 kDa para a isoforma de comprimento total. Devido à iniciação alternativa e modificações pós-traducionais, bandas adicionais podem aparecer. Recomendam-se extratos nucleares de linhas celulares com vias de CEBPA ativas (por exemplo, linhas celulares de hepatoma ou mieloides).
• Na imunohistoquímica (IHC-P), é esperada coloração nuclear em tecidos como fígado, tecido adiposo e medula óssea. A recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo devem ser otimizadas para cada tipo de tecido.
• Para aplicações em ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado como reagente de captura ou detecção. Recomenda-se o pareamento com um anticorpo de detecção ou conjugado secundário adequado para ensaios sensíveis.

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