Anticorpo Monoclonal Anti-CELF1 para WB, IP, ELISA - Q92879

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CELF1

• CELF1 (membro da família Elav-like CUGBP 1) é uma proteína de ligação ao RNA de 52 kDa que regula eventos pós-transcricionais, incluindo splicing alternativo de pré-mRNA, tradução de mRNA e estabilidade do mRNA.
• Medeia a inclusão e/ou exclusão de éxons de maneira específica por tecido e regulada durante o desenvolvimento. Por exemplo, ativa a inclusão do éxon 5 do TNNT2 cardíaco durante a remodelação cardíaca e controla o splicing alternativo dos pré-mRNAs de actinina e INSR.
• CELF1 aumenta a tradução e influencia a escolha do códon de iniciação da tradução do mRNA CEBPB, melhora a tradução de CDKN1A antagonizando CALR3 e medeia a desadenilação rápida do mRNA citoplasmático recrutando PARN para as caudas poli(A).
• A proteína se liga a repetições de tríades (CUG)n, elementos de resposta Bruno (BREs), elementos ricos em AU (AREs) e sequências de enhancer de splicing específicas de músculo (MSE) nos mRNAs alvo.
• CELF1 está envolvido na biogênese de miRNA: liga-se ao microRNA primário pri-MIR140 e, junto com CELF2, regula negativamente o processamento para miRNA maduro. Referências relacionadas: PMID:28431233
• Localização subcelular: CELF1 é encontrado tanto no núcleo quanto no citoplasma, consistente com seus papéis no splicing nuclear e na regulação de mRNA citoplasmático.
• Especificidade de tecido: Expresso de forma onipresente.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e formação de ligações isopeptídicas, que podem modular sua atividade e interações.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região N-terminal (aa 1-100); considere usar esta informação para mapeamento de epítopos ou experimentos de bloqueio.
• Para WB, espere uma banda em ~52 kDa. Otimize a porcentagem do gel (por exemplo, SDS-PAGE a 10%) e as condições de transferência para proteínas de peso molecular médio.
• Dada a reatividade cruzada com humano, camundongo e rato, valide o anticorpo em lisados dessas espécies. Inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Para IP, use contas de proteína A/G dada a origem IgG de coelho. Confirme o enriquecimento por western blot.
• CELF1 sofre múltiplas PTMs que podem causar mudanças de banda; inclua inibidores de fosfatases no tampão de lise se isoformas fosforiladas forem de interesse.
• O anticorpo é adequado para ELISA; considere revestir o antígeno diretamente ou usar um par captura-detecção para ELISA sanduíche.

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