Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CFTR para WB, IF/ICC, ELISA - P13569

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CFTR

• O CFTR (Regulador de Condutância Transmembrana da Fibrose Cística), também designado como membro 7 da subfamília C do cassete de ligação ao ATP (ABCC7), é uma grande glicoproteína transmembrana pertencente à família dos transportadores ABC.
• Funciona principalmente como um canal de cloreto regulado por AMPc que medeia o transporte de íons cloreto através das membranas das células epiteliais, um processo controlado por ciclos de ligação e hidrólise de ATP em seus domínios de ligação de nucleotídeos.
  Referências relacionadas:
  PMID:10792060 PMID:11524016 PMID:11707463
• O CFTR também é permeável a íons bicarbonato (HCO3-) e medeia o fluxo de glutationa dependente de ATP, contribuindo para a homeostase do pH e redox em tecidos epiteliais.
  Referências relacionadas:
  PMID:15010471 PMID:19019741 PMID:12727866
• O canal desempenha um papel fundamental na homeostase do fluido da superfície das vias aéreas e na defesa inata contra patógenos ao regular o transporte de íons e água, impactando a hidratação e a depuração do muco.
  Referências relacionadas:
  PMID:16645176 PMID:19621064 PMID:26823428 PMID:14668433
• O CFTR modula a atividade de outros canais iônicos e transportadores, incluindo a inibição do canal epitelial de sódio ENaC e a regulação do canal de cloreto ANO1, influenciando o transporte líquido de íons.
  Referências relacionadas:
  PMID:12403779 PMID:22121115 PMID:22178883
• Subcelularmente, o CFTR trafega através da via secretora e localiza-se predominantemente na membrana celular apical, endossomos iniciais, endossomos de reciclagem e no retículo endoplasmático, com alguns relatos de localização nuclear.
• O CFTR é expresso em múltiplos tecidos epiteliais, incluindo as vias aéreas respiratórias (epitélio brônquico), ductos pancreáticos, criptas intestinais, glândulas sudoríparas e o trato reprodutivo (oviduto, segmento equatorial do espermatozoide).
  Referências relacionadas:
  PMID:15716351 PMID:22207244 PMID:1284548 PMID:28130590
• A proteína sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, fosforilação, palmitoilação e ubiquitinação, que regulam seu tráfego, estabilidade e atividade do canal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 700–840 dentro do domínio regulatório (R) do CFTR; portanto, o anticorpo policlonal pode reconhecer epítopos nesta região. Para Western Blot, espere uma banda principal migrando perto de 168 kDa; valide o desempenho em um sistema de amostra relevante, como lisados de células epiteliais brônquicas (por exemplo, 16HBE) ou tecido pulmonar.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica, considere que o CFTR se localiza predominantemente na membrana celular apical e vesículas subapicais. Use protocolos de fixação/permeabilização apropriados para preservar a coloração da membrana. A co-coloração com um marcador apical pode ajudar a confirmar a especificidade.
• Espera-se reatividade cruzada com CFTR de camundongo e rato; no entanto, os usuários devem titular o anticorpo e incluir controles adequados para cada espécie e aplicação. Como um reagente policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; recomenda-se revalidar cada novo lote no ensaio pretendido.

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