Anticorpo Policlonal Anti-cGAS para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8N884

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do cGAS

• A sintase de GMP-AMP cíclico (cGAS, também conhecida como MB21D1) é uma nucleotidiltransferase de 522 aminoácidos que catalisa a síntese de 2'3'-cGAMP a partir de ATP e GTP, desempenhando um papel central na imunidade inata.
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• Ao se ligar ao DNA de fita dupla (dsDNA) com mais de 40 pb, o cGAS sofre separação de fases líquido-líquido, formando gotículas que aumentam sua atividade catalítica para produzir 2'3'-cGAMP, que então atua como um segundo mensageiro para ativar o STING1 e induzir interferons do tipo I.
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• Como um sensor de DNA, o cGAS detecta DNA citosólico de patógenos invasores—incluindo vírus de DNA, retrovírus (por exemplo, HIV-2) e bactérias como Mycobacterium tuberculosis—desencadeando respostas imunes antimicrobianas.
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• Em células estressadas ou danificadas, o DNA endógeno que vaza do núcleo ou das mitocôndrias (por exemplo, durante senescência, parada mitótica ou infecção por SARS-CoV-2) ativa o cGAS, ligando-o à inflamação estéril, autoimunidade e senescência celular.
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• O cGAS nuclear é rigidamente regulado: a interação com nucleossomos bloqueia sua atividade de ligação ao DNA para prevenir autoimunidade, enquanto a associação com a PARP1 inibe o reparo de DNA por recombinação homóloga.
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• O cGAS humano apresenta propriedades de reconhecimento de DNA específicas da espécie, produzindo níveis mais baixos de 2'3'-cGAMP em comparação com outros mamíferos, o que pode conferir uma resposta imune mais ajustada.
  Referência relacionada: PMID:30007416
• O cGAS está principalmente no citosol, mas também se localiza no núcleo, cromatina e membrana plasmática. É expresso em células mieloides (por exemplo, linhagem THP-1) e está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação, ubiquitinação e palmitoilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 350–522 do cGAS humano (NP_612450.2), cobrindo o domínio catalítico C-terminal. Para Western blotting, espere uma banda em aproximadamente 59 kDa. Valide a especificidade em linhagens celulares que expressam cGAS, como THP-1.
• Este anticorpo é adequado para detectar cGAS em amostras humanas, de camundongo e rato via WB, IHC-P, IF/ICC e ELISA. Devido à conservação da sequência, a reatividade cruzada deve ser verificada na espécie de interesse.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), a otimização da recuperação antigênica e da diluição do anticorpo primário é recomendada. Para IF/ICC, as condições de permeabilização podem afetar os padrões de coloração nuclear versus citosólica.
• A atividade catalítica do cGAS depende da ligação ao DNA e da separação de fases; portanto, o anticorpo pode ser usado para estudar os estados de ativação do cGAS em conjunto com ensaios bioquímicos.

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