Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-cGAS para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8N884

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do cGAS

• cGAS (sintase de GMP-AMP cíclico), também conhecido como MB21D1 ou C6orf150, é codificado pelo gene CGAS. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• Funciona como uma nucleotidiltransferase que catalisa a síntese do dinucleotídeo cíclico 2'3'-cGAMP a partir de ATP e GTP. Referências relacionadas: PMID:21478870, PMID:23258413, PMID:23707061, PMID:28214358, PMID:28363908
• O cGAS é um sensor de DNA citosólico fundamental que se liga diretamente ao DNA de fita dupla (dsDNA) de comprimento e curvatura suficientes, levando à condensação de fase líquida e ativação enzimática. Referências relacionadas: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794, PMID:30007416
• Após a ativação, o 2'3'-cGAMP produzido pelo cGAS liga-se ao adaptador STING1, desencadeando uma cascata de sinalização que induz interferões do tipo I e outros mediadores imunes. Referências relacionadas: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794
• O cGAS deteta dsDNA de uma vasta gama de patogénios, incluindo vírus de DNA, retrovírus (por exemplo, HIV-2) e bactérias (por exemplo, M. tuberculosis), tornando-o um sentinela imune inato amplo. Referências relacionadas: PMID:28363908, PMID:35613581, PMID:23929945, PMID:24269171, PMID:30270045, PMID:26048138
• Sob stress celular (dano mitocondrial, senescência, dano no DNA), o DNA próprio vaza para o citoplasma ou acumula-se como micronúcleos, ativando aberrantemente o cGAS e impulsionando a inflamação estéril. Referências relacionadas: PMID:28738408, PMID:28759889, PMID:31299200
• O cGAS reside predominantemente no citoplasma, mas também é encontrado no núcleo, onde a sua ligação aos nucleossomos na cromatina inibe a sua atividade para prevenir a ativação autoimune. Referências relacionadas: PMID:31299200, PMID:32911482, PMID:32912999
• Para além da imunidade, o cGAS modula a reparação do DNA ao interagir com o PARP1 para suprimir a recombinação homóloga e deteta stress de tradução ao associar-se a ribossomas colididos. Referências relacionadas: PMID:30356214, PMID:31544964, PMID:34111399
• A expressão tecidular é relatada na linha celular monocítica THP1; as modificações pós-traducionais (acetilação, fosforilação, ubiquitinação, palmitoilagem) regulam dinamicamente a localização e a atividade do cGAS.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde a um peptídeo dentro da região C-terminal (aa 430–522) do cGAS humano. Considere verificar o reconhecimento de todas as variantes de splicing se múltiplas isoformas forem relevantes.
• Para o Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 59 kDa; use controlos positivos apropriados (por exemplo, lisado celular THP1). Valide a especificidade do anticorpo usando amostras com knockout ou knockdown de cGAS.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), podem ser necessárias condições otimizadas de recuperação de antigénio e permeabilização. Inclua controlos apropriados para confirmar a localização nuclear/citosólica.
• Em aplicações de ELISA, certifique-se de que o tampão de revestimento e as condições de deteção são compatíveis com o formato de anticorpo monoclonal de coelho.
• A reatividade cruzada foi testada apenas contra amostras humanas; a reatividade com outras espécies não é caracterizada e deve ser determinada experimentalmente.

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