Anticorpo Policlonais Anti-CGRP para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P01258 / P06881

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CGRP (Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina)

• O gene CALCA sofre splicing alternativo para produzir dois hormônios peptídicos: calcitonina e peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP, também conhecido como CGRP1, CGRP-alfa, CGRP-I). Este anticorpo reconhece especificamente a isoforma CGRP.
• A calcitonina, codificada pelo mesmo gene, é um hormônio peptídico de 32 aminoácidos que reduz rapidamente os níveis de cálcio e fosfato no sangue, promovendo sua deposição nos ossos. No entanto, o anticorpo foi desenvolvido contra a sequência específica do CGRP.
• A sinalização da calcitonina é mediada pelo receptor de calcitonina (CALCR) e pelo complexo receptor CALCR-RAMP2 (AMYR2) (PubMed:35324283). Referências relacionadas: PMID:35324283
• A katacalcina, outro produto de clivagem do precursor, também apresenta atividade redutora de cálcio.
• De acordo com a UniProt, a proteína é secretada e sofre modificações pós-traducionais chave, incluindo amidação, formação de pontes dissulfeto e fosforilação.
• O imunógeno cobre os resíduos 49–128 do pré-pré-peptídeo, englobando a região madura do CGRP; espera-se que o anticorpo detecte tanto as formas precursoras quanto a madura do CGRP em amostras relevantes.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange a região pró do CGRP (aa 49–128). Para Western blot, podem ser observadas bandas de ~13 kDa e/ou ~15 kDa, correspondentes às formas precursoras; o CGRP maduro (~3,8 kDa) pode migrar na frente do corante.
• Considere o uso de géis de tricina de baixa porcentagem ou sistemas de eletroforese especializados para resolver peptídeos pequenos, se for desejada a detecção do CGRP maduro.
• O bloqueio com BSA, em vez de leite, pode reduzir o fundo, pois o CGRP é um peptídeo pequeno e altamente modificado.
• Para imunohistoquímica e imunofluorescência, realize a recuperação de antígeno adequada ao tecido e valide a coloração em tecidos conhecidos por serem positivos para CGRP (por exemplo, neurônios sensoriais, tecido cardiovascular).
• A reatividade cruzada é relatada para camundongo e rato; no entanto, os níveis de expressão endógena variam entre tecidos e estados de doença, por isso é recomendada a otimização da preparação da amostra.

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