Anticorpo policlonal de coelho anti-CHAC1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9BUX1

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CHAC1

• CHAC1 (gama-glutamilciclotransferase 1 específica para glutationa), também conhecida como Botch ou proteína 1 semelhante ao regulador do transporte de cátions, é uma proteína de 24,4 kDa codificada pelo gene CHAC1 (ID do Gene: 79094).
• Atua como uma gama-glutamilciclotransferase específica para glutationa, clivando a glutationa em 5-oxo-L-prolina e Cys-Gly, com especificidade pela glutationa em relação a outros peptídeos gama-glutamil. Referências relacionadas: PMID:27913623
• CHAC1 promove a apoptose ao depletar a glutationa e funciona como um componente pró-apoptótico da via de resposta a proteínas mal dobradas (UPR), mediando os efeitos da cascata ATF4-ATF3-DDIT3/CHOP. Referências relacionadas: PMID:19109178
• Regula negativamente a sinalização Notch durante a neurogênese embrionária ao inibir a clivagem de Notch pela furina, mantendo Notch em uma forma imatura e inativa e, consequentemente, promovendo a neurogênese. Referências relacionadas: PMID:22445366
• Em termos subcelulares, CHAC1 localiza-se no citoplasma, no citosol e no aparelho de Golgi, particularmente na rede trans-Golgi.
• Palavras-chave: splicing alternativo, apoptose, liase, neurogênese, via de sinalização Notch, resposta a proteínas mal dobradas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 1-222 (CHAC1 de comprimento total, NP_077016.3), podendo reconhecer múltiplos epítopos e sendo esperado que detecte CHAC1 endógeno.
• Considere utilizar um gel de SDS-PAGE desnaturante para western blotting, no qual o peso molecular previsto de CHAC1 é de aproximadamente 24 kDa; valide o tamanho da banda no seu sistema de amostra.
• Controles positivos adequados incluem linhagens celulares ou tecidos conhecidos por expressarem CHAC1 em condições de resposta a proteínas mal dobradas (por exemplo, indução de estresse do retículo endoplasmático); inclua um controle de carregamento.
• Para imunofluorescência e imuno-histoquímica, otimize as condições de fixação e permeabilização e considere a recuperação antigênica para cortes incluídos em parafina.
• A reatividade cruzada foi relatada para humanos, camundongos e ratos; contudo, recomenda-se realizar testes preliminares no seu sistema experimental para verificar a reatividade e minimizar a ligação não específica.
• As aplicações em ELISA podem exigir a otimização das condições de revestimento e da diluição do anticorpo; um formato de ELISA direto ou indireto pode ser explorado dependendo do desenho do ensaio.

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