Anticorpo policlonal de coelho anti-CHAMP1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q96JM3

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de CHAMP1

• CHAMP1 (fosfoproteína 1 de manutenção do alinhamento cromossômico), também conhecida como proteína de dedo de zinco 828, é uma proteína nuclear com peso molecular aparente de aproximadamente 89 kDa que desempenha um papel fundamental na segregação cromossômica mitótica.
• É necessária para o alinhamento adequado dos cromossomos na placa metafásica e garante a segregação correta ao manter a ligação dos microtúbulos do fuso aos cinetócoros durante a biorientação das cromátides-irmãs.
• CHAMP1 pode recrutar as proteínas associadas ao cinetócoro CENPE (proteína E do centrômero) e CENPF para o cinetócoro, facilitando as interações entre microtúbulos e cinetócoros.
• A proteína se localiza no núcleo e se concentra na região do centrômero/cinetócoro dos cromossomos durante a mitose; também é encontrada associada ao fuso mitótico e ao citoesqueleto citoplasmático.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que provavelmente regulam suas funções mitóticas.
• CHAMP1 contém um domínio de dedo de zinco, sugerindo capacidades de ligação ao DNA ou a proteínas que podem contribuir para suas funções de direcionamento à cromatina ou ao cinetócoro.
• Mutações em CHAMP1 estão associadas à deficiência intelectual (MRD40/NEDHILD), ressaltando sua importância no neurodesenvolvimento e na divisão celular.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Como o imunógeno abrange as regiões 563–812, o anticorpo provavelmente reconhece tanto a CHAMP1 de comprimento completo quanto quaisquer isoformas que contenham essa porção C-terminal; valide a especificidade em sistemas de knockout ou knockdown.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 89 kDa; considere utilizar um gel de alta porcentagem (por exemplo, 8–10%) com tempo de transferência adequado para proteínas de alto peso molecular.
• Para imunofluorescência/ICC, os métodos de fixação e permeabilização podem influenciar a marcação do cinetócoro/cromossomo; teste a fixação com metanol ou formaldeído com permeabilização por Triton X-100.
• O anticorpo apresenta reação cruzada com CHAMP1 de camundongo, tornando-o adequado para estudos em linhagens celulares ou tecidos murinos; contudo, o alinhamento da sequência na região do imunógeno deve ser verificado.
• Realize experimentos de titulação por ELISA para determinar a concentração ideal do antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo para configurações de ELISA sanduíche ou direto.

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