Anticorpo Policlonais Anti-CHAT para WB, IHC, IF, ELISA - P28329

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Colina O-acetiltransferase

• A colina O-acetiltransferase (CHAT, também conhecida como CHOACTASE) é a enzima responsável pela síntese do neurotransmissor acetilcolina a partir de acetil-CoA e colina.
• A CHAT catalisa a reação reversa nas sinapses colinérgicas, desempenhando um papel crítico na neurotransmissão tanto no sistema nervoso central quanto no periférico.
• Como enzima chave na biossíntese da acetilcolina, a CHAT é essencial para a função dos neurônios colinérgicos e está implicada na sinalização neuromuscular.
• Mutações no gene CHAT estão associadas à síndrome miastênica congênita (SMC), um grupo de distúrbios neuromusculares caracterizados por transmissão de sinal defeituosa na junção neuromuscular.
• A CHAT sofre splicing alternativo, gerando múltiplas isoformas que podem exibir padrões de expressão tecido-específicos.
• A proteína sofre fosforilação, indicando papéis regulatórios potenciais na atividade enzimática por meio de modificações pós-traducionais.
• Classificada como aciltransferase e transferase, a CHAT pertence a uma família de enzimas que transferem grupos funcionais aos substratos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 331-630 da CHAT humana, uma região provavelmente conservada entre humanos, camundongos e ratos, o que sustenta a afirmação de reatividade cruzada.
• Para Western blot (WB), considere usar condições desnaturantes/redutoras e espere uma banda predominante perto de 83 kDa, consistente com a proteína CHAT de comprimento total; valide com lisados de controle positivo de tecidos cerebrais de humano, camundongo ou rato.
• Em aplicações de imunofluorescência (IF/ICC ou IF-P) e imunohistoquímica (IHC-P), teste o desempenho do anticorpo em células ou seções de tecido fixadas e permeabilizadas; recomenda-se a inclusão de controles negativos (por exemplo, amostras com knockout ou depleção de CHAT).
• Quando usado em ELISA, a natureza policlonal pode fornecer sinal aumentado; no entanto, a consistência entre lotes deve ser verificada para ensaios quantitativos.
• Para maximizar a especificidade, recomenda-se que os pesquisadores titulem o anticorpo para seus sistemas de ensaio específicos e confirmem os resultados com reagentes de detecção secundários otimizados para IgG de coelho.

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