Anticorpo Monoclonal Anti-ChAT de Coelho para WB, ELISA - P28329

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ChAT

• A colina O-acetiltransferase (ChAT) também é conhecida pelos apelidos CHOACTASE, CMS6, CMS1A e CMS1A2.
• Ela catalisa a síntese reversível de acetilcolina (ACh) a partir de acetil CoA e colina nas sinapses colinérgicas, uma etapa fundamental na neurotransmissão colinérgica.
• A ChAT é altamente expressa em neurônios colinérgicos dos sistemas nervosos central e periférico, e se localiza nos terminais pré-sinápticos.
• O splicing alternativo do gene CHAT gera múltiplas variantes de transcrito, que podem influenciar a atividade ou regulação da enzima.
• Modificações pós-traducionais, incluindo a fosforilação, já foram identificadas, embora seu impacto funcional ainda esteja em investigação.
• Mutações no gene CHAT estão associadas à síndrome miastênica congênita (CMS), um grupo de distúrbios caracterizados por comprometimento da transmissão neuromuscular.
• A proteína tem um peso molecular previsto de aproximadamente 83 kDa, o que é consistente com a observação validada do produto em Western blot.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• A sequência do imunógeno (aminoácidos 649‑748) está localizada em uma região altamente conservada entre humano, camundongo e rato, o que explica a ampla reatividade cruzada. Leve isso em consideração ao analisar resultados entre diferentes espécies.
• Para Western blot, execute a eletroforese das amostras em condições redutoras e espere uma banda específica próxima a 83 kDa. Use uma membrana de PVDF com baixa fluorescência para uma detecção ideal.
• Em protocolos de ELISA, este anticorpo pode ser usado tanto como reagente de captura quanto de detecção; faça a titulação cuidadosa contra a proteína ChAT recombinante ou lisados de tecidos nativos.
• Realize o bloqueio com 5% de leite desnatado ou BSA em TBST e incube o anticorpo primário overnight a 4°C para obter a melhor relação sinal-ruído.
• Sempre valide o anticorpo na sua matriz de amostra específica (por exemplo, homogenato cerebral, preparações de terminais nervosos) antes de realizar ensaios quantitativos.

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