Anticorpo Policlonal Anti-CHD4 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14839

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CHD4

• CHD4 (Proteína de ligação ao DNA-helicase-dominio de cromatina 4), também conhecido como Mi2-beta, é um remodelador de cromatina dependente de ATP que se liga e distorce o DNA nucleossomal. Referências relacionadas: PMID:28977666 PMID:32543371
• É um componente central do complexo NuRD (Complexo de Desacetilase e Remodelagem de Nucleossomos), que acopla a remodelagem da cromatina com a desacetilação de histonas para regular a transcrição. Referências relacionadas: PMID:16428440 PMID:17626165 PMID:28977666
• O CHD4 é recrutado para quebras de fita dupla de DNA via ZMYND8, onde facilita a repressão transcricional e promove o reparo por recombinação homóloga. Referências relacionadas: PMID:25593309
• A proteína está implicada na neurogênese, embora os detalhes mecanísticos permaneçam a ser totalmente elucidados.
• O CHD4 contém dois cromodomínios, um domínio central ATPase/helicase e múltiplos motivos dedo de zinco, dotando-o de atividades de ligação ao DNA e remodelagem de nucleossomos.
• Localiza-se predominantemente no núcleo, mas também é detectado no citoplasma e no centro organizador de microtúbulos/centrossomo.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação, podem modular a estabilidade, localização e interações do CHD4.
• O CHD4 é amplamente expresso em tecidos humanos, refletindo seu papel fundamental na regulação da cromatina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1520-1690 dentro da região terminal C do CHD4 humano. Este segmento é conservado em camundongos e ratos, consistente com a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blot, espere uma banda em aproximadamente 218 kDa. Use um gel de baixa porcentagem (por exemplo, 6-8%) e tempos de transferência estendidos ou transferência úmida para proteínas de alto peso molecular.
• Valide o anticorpo em seu tipo específico de amostra e condições de fixação para IHC-P e IF/ICC. A recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6,0) pode melhorar o sinal.
• Como um anticorpo policlonal, a variabilidade lote a lote é possível; inclua controles apropriados (por exemplo, lisados de knockdown por siRNA ou knockout) para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, otimize o antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo com base no formato do seu ensaio.

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