Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CHIT1 para WB, IHC-P, ELISA - Q13231

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CHIT1

• CHIT1 codifica a chitotriosidase-1, uma glicoproteína secretada pertencente à família das glicosil hidrolases 18, envolvida na degradação da quitina.
• A proteína hidrolisa quitina, quitotriose e quitobiose, desempenhando um papel na defesa contra patógenos contendo quitina, como nematódeos.
• O splicing alternativo produz a isoforma 3, que carece de atividade enzimática.
• A localização subcelular inclui secreção no espaço extracelular e compartimento lisossomal.
• A expressão tecidual é proeminente no baço e macrófagos, consistente com uma função de defesa imunológica.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de ligações dissulfeto, essenciais para estabilidade e atividade.
• Contém um domínio de ligação à quitina; classificada sob hidrolase, metabolismo de carboidratos e degradação de polissacarídeos.
• Evidências de sequenciamento proteico direto suportam sua identificação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 217–466 do CHIT1 humano, visando o domínio catalítico, mas excluindo o peptídeo sinal. Esta região pode detectar tanto as isoformas ativas quanto a isoforma 3 cataliticamente inativa, se o epítopo for conservado.
• Para Western blotting (WB), considere usar lisados de linhagens de células de macrófagos humanos ou tecido do baço como controles positivos. Tamanho de banda esperado ~52 kDa; observe que a glicosilação pode causar pequenos deslocamentos de migração.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), teste o desempenho do anticorpo em seções de baço humano fixadas em formalina e embebidas em parafina, com métodos apropriados de recuperação de antígeno.
• Aplicações de ELISA podem ser usadas para quantificar CHIT1 recombinante ou proteína endógena em fluidos biológicos; valide com uma curva padrão usando proteína purificada.
• A reatividade cruzada com camundongo sugere utilidade em modelos de camundongo; no entanto, o alinhamento de sequências é recomendado para confirmar a conservação do epítopo.

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