Anti-Chk1 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O14757

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Chk1

• Chk1 (Checkpoint kinase-1) é uma serina/treonina proteína quinase codificada pelo gene CHEK1, funcionando como uma quinase chave de ponto de verificação do ciclo celular.
• Necessário para a prisão do ciclo celular mediada por ponto de verificação e ativação do reparo de DNA em resposta à presença de danos no DNA ou DNA não replicado. Referências relacionadas: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Reconhece a sequência de consenso do substrato [R-X-X-S/T] e fosforila CDC25A, CDC25B e CDC25C, levando à sua inibição via ligação 14-3-3 ou degradação proteassomal, bloqueando assim a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:19734889, PMID:20090422
• Fosforila RAD51 em Thr-309, aumentando sua associação à cromatina para promover o reparo de DNA por recombinação homóloga. Referências relacionadas: PMID:15665856
• Fosforila TP53 em múltiplos sítios C-terminais, promovendo a ativação de TP53 por acetilação, levando à prisão do ciclo celular e supressão da proliferação. Referências relacionadas: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Modula a montagem da cromatina fosforilando TLK1, impedindo a fosforilação de ASF1A, e participa do reparo de ligações cruzadas de DNA via fosforilação de FANCE. Referências relacionadas: PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:17296736
• Localiza-se no núcleo, cromossomo, citoplasma e centrossomo.
• Expresso ubiquamente, com os níveis mais altos no timo, testículo, intestino delgado e cólon.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange uma região central conservada (aa 148–307) do Chk1, suportando a reatividade cruzada com humano, camundongo e rato. A validação na espécie relevante é recomendada.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em torno de 54 kDa. Lisados de timo ou testículo, que expressam níveis altos de Chk1, podem servir como controles positivos.
• Ao realizar IHC-P ou IF/ICC, considere a otimização da fixação e permeabilização para melhorar a detecção de Chk1 nuclear e centrossomal.
• ELISA pode ser usado para quantificar Chk1 em lisados celulares ou preparações de proteína recombinante; a calibração contra uma curva padrão na matriz específica é aconselhada.

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