Anti-Chk2 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IF/ICC, IP, ELISA - O96017

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Chk2

• Chk2 (Quinase de ponto de verificação 2, codificada por CHEK2) é uma serina/treonina proteína quinase que atua como mediador central da resposta a danos no DNA, fosforilando efetores a jusante para impor parada do ciclo celular, reparo do DNA ou apoptose após quebras de fita dupla.
• Preferencialmente fosforila substratos na sequência consenso [L-X-R-X-X-S/T] (PubMed:37943659). Referências relacionadas: PMID:37943659
• Chk2 regula os pontos de verificação G1/S, S e G2/M fosforilando e inibindo as fosfatases CDC25 (CDC25A, B, C), mantendo assim a fosforilação inibitória de tirosina nos complexos CDK-ciclina.
• Promove o reparo do DNA por recombinação homóloga através da fosforilação de BRCA2, que aumenta o carregamento de RAD51 na cromatina, e estimula a transcrição de genes de reparo via ativação de FOXM1.
• Como supressor de tumores, Chk2 também desencadeia a apoptose fosforilando p53/TP53 em Ser-20, reduzindo a degradação mediada por MDM2, e ativando o fator de transcrição E2F1.
• Chk2 medeia a inibição dependente de CCAR2 de SIRT1, um processo crítico para a acetilação de p53 e apoptose (PubMed:25361978). Referências relacionadas: PMID:25361978
• Sob estresse oxidativo, Chk2 fosforila TRIM32 em Ser-55, promovendo a ubiquitinação de ATG7 e regulando positivamente a autofagia (PubMed:37943659). Referências relacionadas: PMID:37943659
• Chk2 está predominantemente localizado no núcleo, incluindo corpos PML e o nucleoplasma, e é altamente expresso em testículos, baço, cólon e leucócitos de sangue periférico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região N-terminal (resíduos 1-220) do Chk2 humano, que inclui o domínio da quinase; considere a acessibilidade do epítopo sob diferentes condições de fixação e desnaturação.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de ~61 kDa, mas bandas adicionais podem aparecer devido ao splicing alternativo ou modificações pós-traducionais; valide a especificidade usando controles apropriados.
• Este anticorpo policlonal é aplicável para imunoprecipitação e ELISA; para IF/ICC, recomenda-se a otimização das etapas de permeabilização e bloqueio para minimizar o fundo.
• Como a ativação do Chk2 é estimulada por danos no DNA, o tratamento de células com agentes genotóxicos (por exemplo, etoposídeo, radiação ionizante) pode aumentar a detecção de formas fosforiladas.

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