Anticorpo Policlonal Anti-CISH para WB, IF/ICC, ELISA - Q9NSE2

Contexto Biológico: Função e Localização do CISH

• CISH (proteína contendo domínio SH2 indutível por citocina), também conhecido como CIS-1, G18 e SOCS, é um membro da família de supressores de sinalização de citocinas (SOCS).
• Funciona como um regulador de feedback negativo da transdução de sinais de citocinas, inibindo especificamente a via JAK-STAT5 ativada pela eritropoietina, prolactina e interleucina 3 (IL3).
• O CISH suprime a transativação do STAT5 bloqueando sua fosforilação em tirosina, atenuando assim a sinalização a jusante.
• Pode atuar como um componente de reconhecimento de substrato de um complexo de ligase de ubiquitina E3, mediando a ubiquitinação e degradação proteassomal de proteínas alvo.
• A proteína é expressa em vários tecidos epiteliais, com expressão abundante no fígado e rim, e níveis mais baixos no pulmão. As isoformas 1 e 1B mostram distribuições teciduais distintas.
• Palavras-chave associadas ao CISH incluem splicing alternativo, domínio SH2, inibidor de transdução de sinais e via de conjugação Ubl, refletindo seus papéis regulatórios.
• A proteína tem um peso molecular de aproximadamente 28,7 kDa (UniProt), consistente com os 29 kDa observados.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em ~29 kDa. Valide a especificidade usando controles positivos (por exemplo, linhagens de células epiteliais estimuladas) e controles negativos (amostras com knockout de CISH ou tratadas com siRNA) para confirmar a identidade da banda.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), otimize as condições de fixação e permeabilização para o tipo de célula específico. Inclua controles de isotipo e considere a coloração simultânea com marcadores de organelas para visualizar a localização subcelular.
• Para ELISA, use o anticorpo como reagente de captura ou detecção; a reatividade cruzada com CISH de camundongo e rato foi observada, mas a titulação e validação na matriz de amostras de cada espécie são recomendadas.
• A natureza policlonal pode resultar em variabilidade entre lotes; considere solicitar a retenção de um lote de amostra para estudos de longo prazo consistentes.

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