Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Citrato Sintase para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75390

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Citrato Sintase

• A proteína alvo é a citrato sintase, uma enzima mitocondrial pertencente à família das transferases, especificamente as aciltransferases que convertem grupos acil em grupos alquil na transferência.
• Ela catalisa a condensação da acetil coenzima A e do oxaloacetato para formar citrato, o primeiro passo e limitante da velocidade do ciclo do ácido tricarboxílico (TCA), uma via central na produção de energia.
• Esta enzima está localizada exclusivamente na matriz mitocondrial, onde o ciclo TCA opera, fornecendo precursores para a fosforilação oxidativa.
• Como uma enzima chave do ciclo TCA, a atividade da citrato sintase é frequentemente usada como um marcador para o conteúdo mitocondrial e capacidade oxidativa em tecidos.
• A enzima passa por várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação e conjugação com ubiquitina, que podem modular sua atividade.
• A proteína foi extensivamente caracterizada através de estudos cristalográficos (estrutura 3D disponível) e sequenciamento proteico direto, confirmando seu peso molecular de aproximadamente 52 kDa (calculado ~52 kDa a partir de NP_004068.2).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 28–145 da citrato sintase humana, uma região provavelmente exposta após o processamento mitocondrial, sugerindo o reconhecimento da forma endógena madura.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima a 52 kDa; carregar frações enriquecidas em mitocôndrias ou usar lisados celulares totais de tecidos metabolicamente ativos pode melhorar a detecção.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), garanta uma recuperação antigênica adequada e considere validar o sinal em tecidos com alta densidade mitocondrial (ex.: coração, músculo esquelético).
• A reatividade cruzada do anticorpo com a citrato sintase de camundongo e rato permite estudos em modelos pré-clínicos comuns; sempre inclua controles positivos e negativos apropriados para cada aplicação.
• Para aplicações de ELISA, as condições ideais de revestimento e diluição do anticorpo devem ser determinadas empiricamente usando citrato sintase recombinante como padrão.

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