Anticorpo monoclonal de coelho anti-CKM/CKB para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P06732

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da creatina quinase do tipo M (CKM)

• A CKM (creatina quinase do tipo M), também conhecida como M-CK ou CPK-M, é uma enzima essencial no metabolismo energético celular (UniProt: P06732).
• Ela catalisa reversivelmente a transferência de um grupo fosfato entre o ATP e a creatina fosfato, mantendo os níveis de ATP em tecidos com demandas energéticas elevadas e variáveis, como o músculo esquelético, o coração e o cérebro.
• A CKM pertence à família das creatina quinases, que inclui isoformas citosólicas e mitocondriais, cada uma com distribuição específica nos tecidos.
• A proteína está predominantemente localizada no citoplasma, onde facilita o tamponamento e o transporte rápidos de energia.
• A CKM é uma fosfoproteína sujeita a modificações pós-traducionais que podem regular sua atividade e localização subcelular.
• As palavras-chave do UniProt destacam seus papéis na ligação ao ATP, ligação a nucleotídeos, atividade de quinase e sinalização de fosfoproteínas.
• O peso molecular canônico da CKM é de aproximadamente 43 kDa, em concordância com o desenho do imunógeno.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 3-381 da CKM humana (NP_001815.2), cobrindo quase toda a extensão da proteína, o que sugere que o anticorpo reconhece a conformação nativa.
• Para Western blot, uma diluição inicial de 1:1000 costuma ser adequada, mas recomenda-se a otimização para o tipo específico de amostra e o sistema de detecção.
• Na imunofluorescência (IF-P), a permeabilização com Triton X-100 a 0,1% é geralmente compatível; amostras fixadas podem se beneficiar da otimização da recuperação antigênica.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), pode-se testar a recuperação de epítopos induzida por calor em tampão citrato (pH 6,0); a diluição do anticorpo deve ser determinada empiricamente.
• Conforme indicado, o anticorpo apresenta reatividade cruzada com a CKM de camundongo e rato, sendo adequado para estudos em modelos de roedores.
• Sempre inclua controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisados de tecidos ricos em CKM e amostras knockout/knockdown) para confirmar a especificidade.

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