Anticorpo monoclonal anti-cadeia pesada da clatrina para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q00610

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da cadeia pesada 1 da clatrina

• A cadeia pesada 1 da clatrina (CLTC) constitui o principal componente estrutural da rede poliédrica que reveste as fossetas endocíticas e as vesículas de transporte, desempenhando um papel crítico na endocitose mediada por receptores e no tráfego intracelular de membranas.
• Dois complexos distintos de proteínas adaptadoras (AP-2 e AP-1) conectam a rede de clatrina à membrana plasmática e à rede trans-Golgi, respectivamente, selecionando a carga para as vesículas em formação.
• A CLTC forma um complexo com TACC3 e ch-TOG que estabiliza as fibras do cinetócoro durante a mitose ao fazer a ponte entre os microtúbulos, contribuindo para a integridade do fuso mitótico.
  Referências relacionadas: PMID:15858577, PMID:16968737, PMID:21297582
• O complexo TACC3/ch-TOG/clatrina é essencial para a manutenção da tensão adequada das fibras do cinetócoro, garantindo a segregação cromossômica precisa.
  Referências relacionadas: PMID:23532825
• A CLTC participa da formação inicial do autofagossomo, destacando seu papel na remodelação de membranas relacionada à autofagia.
  Referências relacionadas: PMID:20639872
• Subcelularmente, a cadeia pesada 1 da clatrina localiza-se nas membranas de vesículas citoplasmáticas, nas fossetas revestidas, nos melanossomos e no fuso mitótico, refletindo suas diversas funções no tráfego e na divisão celular.
• As principais modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, e a proteína está sujeita a splicing alternativo, com implicações para a dinâmica da rede e para doenças (por exemplo, variantes associadas à deficiência intelectual).

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo C-terminal (aa 1571-1670) da CLTC humana; é provável que a região do epítopo seja conservada entre humanos, camundongos e ratos, justificando a reatividade cruzada indicada. Valide a reatividade no seu sistema de amostra específico.
• Para western blot (WB), o peso molecular observado é de aproximadamente 187 kDa; assegure tempo de transferência adequado e manuseio apropriado da membrana para proteínas de alto peso molecular.
• O formato monoclonal de coelho proporciona alta especificidade e consistência entre lotes; considere utilizá-lo como uma ferramenta confiável de detecção da clatrina em imunoprecipitação (IP) e imunofluorescência (IF/ICC).
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação antigênica podem exigir otimização; um protocolo padrão de recuperação de epítopos induzida por calor (HIER) à base de citrato é um ponto de partida comum.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo monoclonal purificado pode atuar como reagente de captura ou detecção no desenvolvimento de ensaios específicos; recomenda-se realizar testes de compatibilidade entre pares.

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