Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Cleaved Caspase-1 p20 para WB, ELISA - P29466

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Caspase-1

• A caspase-1 é uma protease tiol pertencente à família das caspases, codificada pelo gene CASP1 (também conhecido como IL1BC, ICE). É sintetizada como um zimogênio inativo (p45) que é processado proteoliticamente em subunidades ativas p20 e p10.
• Desempenha um papel central nas respostas inflamatórias ao clivar as formas precursoras da interleucina-1 beta (pro-IL1B) e interleucina-18 (pro-IL18) em suas citocinas maduras biologicamente ativas, após a montagem de complexos de inflamassoma. Referências relacionadas: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• Além disso, a caspase-1 inicia a piroptose, uma morte celular programada lítica, ao clivar a Gasdermina-D (GSDMD), gerando um fragmento N-terminal que forma poros na membrana. Referências relacionadas: PMID:26375003, PMID:32051255, PMID:32109412, PMID:32553275
• Durante a infecção bacteriana, a caspase-1 cliva e ativa a caspase-7 (CASP7), contribuindo para o reparo da membrana plasmática. Referências relacionadas: PMID:22464733
• Na imunidade antiviral, a caspase-1 controla as respostas induzidas por vírus de DNA ao clivar e inativar a sintase de GMP-AMP cíclico (CGAS). Referências relacionadas: PMID:28314590
• A localização subcelular inclui o citoplasma e a membrana celular, consistente com seu papel no processamento de citocinas e execução da piroptose.
• A expressão tecidual nos tecidos é ampla, com níveis mais altos no baço e pulmão, e quantidades detectáveis no fígado, coração, intestino delgado, cólon, timo, próstata, músculo esquelético, leucócitos de sangue periférico, rim e testículo; a expressão está ausente no cérebro.
• A proteína está sujeita a splicing alternativo e formação de ligações isopeptídicas, e sua ativação envolve processamento autoproteolítico intermolecular; pertence à família de peptidases C14A.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo monoclonal é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 200–300 dentro da subunidade p20 da caspase-1 humana. Esta região é prevista como acessível na forma clivada e ativa da enzima.
• Para análise de Western blot (WB), prepare lisados de células ou tecidos em condições redutoras. Considere o uso de indutores conhecidos da ativação da caspase-1 (por exemplo, ativadores do inflamassoma NLRP3, como nigericina ou ATP) para observar o fragmento p20 clivado. Uma banda de aproximadamente 20 kDa é esperada ao lado de formas pro potenciais de comprimento total ou intermediárias.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção da caspase-1 p20 clivada em soro humano, plasma ou sobrenadantes de cultura de células; a diluição ideal e o emparelhamento devem ser determinados empiricamente.
• A reatividade cruzada com outras espécies não foi relatada; valide o anticorpo nos sistemas de amostra relevantes se espécies outras que não humanas forem alvo.
• Dado os múltiplos pesos proteicos relatados (10/29/35/42/45 kDa), estes provavelmente representam diferentes intermediários de clivagem e isoformas; confirme a identidade das bandas detectadas usando controles apropriados (por exemplo, amostras não tratadas vs. ativadas).

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