Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Caspase 3 Clivada p12 para WB, ELISA - P42574

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Caspase-3

• A Caspase-3, também conhecida como Apopain, CPP32, Yama ou SCA-1, é uma protease tiol e uma efetora principal da caspase que executa a apoptose após ativação pelas caspases iniciadoras (CASP8, CASP9, CASP10).
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• Após ativação, ela cliva numerosos substratos, incluindo PARP1 em Asp216-Gly217, SREBPs, caspases-6, -7, -9 e IL18, orquestrando assim a desmontagem celular.
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• Além da apoptose, contribui para a piroptose clivando a gasdermina-E (GSDME), inibe a produção de interferon tipo I durante infecção viral ao direcionar CGAS, IRF3 e MAVS, e media a exposição de fosfatidilserina via scramblases da família XKR.
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• A Caspase-3 está primariamente localizada no citoplasma e é altamente expressa em pulmão, baço, coração, fígado e rim, com níveis moderados no cérebro e músculo esquelético, e a mais alta expressão em células do sistema imunológico.
• Sua atividade é regulada pela clivagem proteolítica do zimogênio inativo para as subunidades ativas p12 e p17, e sofre modificações pós-traducionais como fosforilação, acetilação e S-nitrosilação.
• A clivagem da huntingtina mediada pela Caspase-3 está implicada na patologia da doença de Huntington, e ela também cliva proteínas de adesão celular como DSG2 e JUP para facilitar o desprendimento de células apoptóticas.
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Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para gerar este anticorpo corresponde à subunidade p12 da caspase-3 clivada (aminoácidos 171–270); portanto, espera-se que reconheça a forma clivada ativa com alta especificidade em relação à pró-caspase-3 de comprimento total. No entanto, verifique a especificidade do estado de clivagem em seu sistema.
• Para análise por Western blot, considere usar lisados de células induzidas à apoptose (por exemplo, tratamento com estaurosporina ou etoposídeo) para detectar o fragmento clivado p12; otimize as condições de carga e transferência para esta proteína de baixo peso molecular.
• Em aplicações de ELISA, este anticorpo monoclonal pode ser adequado como reagente de detecção quando pareado com um anticorpo de captura que reconhece um epítopo diferente; garanta a validação adequada do par de anticorpos em seu ensaio.
• O anticorpo é validado para amostras humanas; a reatividade cruzada com outras espécies não foi determinada, portanto, confirme a reatividade se usado com amostras não humanas.
• Como um anticorpo monoclonal de coelho, oferece variabilidade reduzida entre lotes; no entanto, cada novo lote deve ser testado em sua aplicação específica.

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