Anticorpo policlonal de coelho anti-CLEC2D para WB e ELISA - Q9UHP7

Especificações e parâmetros essenciais do produto

Contexto biológico: função e localização do CLEC2D

• CLEC2D (membro D da família 2 do domínio de lectina do tipo C), também conhecido como LLT1, OCIL ou CLAX, é um receptor transmembranar pertencente à superfamília das lectinas do tipo C. É codificado pelo gene CLEC2D e existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• Atua como receptor para KLRB1 (CD161) nas células natural killer (NK), inibindo a citotoxicidade mediada por células NK e protegendo as células-alvo da lise.
  Referências relacionadas: PMID:16339513, PMID:20843815
• Funciona como regulador negativo da remodelação óssea, inibindo a formação de osteoclastos e a reabsorção óssea.
  Referências relacionadas: PMID:14753741, PMID:15123656
• Modula as respostas imunológicas regulando a liberação de interferon-gama, conectando a imunidade inata à homeostase óssea.
  Referências relacionadas: PMID:15104121
• Liga-se a glicosaminoglicanos sulfatados de alto peso molecular, que podem mediar suas interações com componentes da matriz extracelular.
  Referências relacionadas: PMID:15123656
• Localiza-se predominantemente na membrana celular, mas também é detectado no retículo endoplasmático, em conformidade com seu papel como receptor transmembranar de sinalização.
• É expresso em leucócitos do sangue periférico, linfonodos, timo e baço, com isoformas presentes em células T, células B e, em níveis mais baixos, em células NK e células dendríticas.
• Apresenta um domínio típico semelhante à lectina do tipo C, topologia transmembranar de âncora de sinal, ligações dissulfeto e glicosilação ligada a N, conforme indicado por análises de sequência e dados estruturais (palavras-chave do UniProt).

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 60–154 do CLEC2D humano (NP_037401.1), correspondentes ao domínio extracelular semelhante à lectina do tipo C; espera-se que o anticorpo reconheça o CLEC2D nativo exposto na superfície. Para aplicações que exigem a detecção da proteína endógena, considere a validação em linhagens celulares relevantes (por exemplo, células NK, células B e osteoblastos) ou em populações de células primárias.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 22 kDa com base na sequência de aminoácidos; no entanto, a glicosilação pode resultar em uma massa molecular aparente mais elevada. Inclua controles positivos apropriados e marcadores de peso molecular. O anticorpo também pode detectar isoformas resultantes de splicing alternativo.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; o imunógeno recombinante (aa 60–154) pode servir como padrão. Foi relatada reatividade cruzada com o CLEC2D de camundongo, mas a homologia de sequência deve ser verificada se o anticorpo for utilizado em modelos murinos.
• Se utilizado em imunofluorescência ou citometria de fluxo, pode ser necessária a permeabilização para acessar os reservatórios intracelulares localizados no retículo endoplasmático, enquanto a marcação de superfície pode ser realizada em células vivas não permeabilizadas.
• Sempre otimize empiricamente a diluição do anticorpo e as condições de incubação para cada aplicação e tipo de amostra. Este anticorpo é fornecido como soro policlonal e pode apresentar variabilidade entre lotes; a consistência deve ser verificada em ensaios críticos.

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