Anticorpo Policlonal Anti-CLEC4D para WB, IF-P, ELISA - Q8WXI8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CLEC4D

• Também conhecida como Dectin-3, CD368 e CLECSF8, a CLEC4D é um membro da família das lectinas tipo C que atua como um receptor de reconhecimento de padrões (PRR) no sistema imunológico inato.
• A CLEC4D reconhece padrões moleculares associados a danos (DAMPs) e padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs) de bactérias e fungos, incluindo α-mananos em hifas de Candida albicans e trealose 6,6'-dimicolato (TDM) micobacteriano. Referências relacionadas: PMID:23602766 PMID:23911656
• Após a ligação ao ligante, a CLEC4D provavelmente forma um complexo com a cadeia gama do receptor Fc (FCER1G) via CLEC4E (Mincle), levando à fosforilação do motivo ITAM, ativação de SYK-CARD9-NF-kB e subsequente maturação de células apresentadoras de antígenos com indução de respostas de células T-helper 1 e 17. Referências relacionadas: PMID:23602766 PMID:23911656
• A CLEC4D atua como um receptor endocítico que pode facilitar a captação de antígenos em locais de infecção para depuração ou para processamento e apresentação às células T. Referências relacionadas: PMID:14971047
• Subcelularmente, a CLEC4D localiza-se na membrana celular como uma proteína transmembrana com uma única hélice de ancoragem de sinal.
• A expressão tecidual ocorre predominantemente em monócitos e macrófagos, podendo ser regulada positivamente por citocinas como IL-6, IL-10, TNF e IFN-gama.
• As principais modificações pós-tradução incluem glicosilação ligada a N e formação de pontes dissulfeto, contribuindo para sua estabilidade estrutural e propriedades de ligação ao ligante.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 39–215 da CLEC4D humana (NP_525126.2); portanto, o anticorpo policlonal pode reconhecer o domínio extracelular de ligação ao ligante e, potencialmente, a região da haste. Considere que a glicosilação pode influenciar a acessibilidade do epítopo.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de ~25 kDa, mas formas glicosiladas podem migrar em posições superiores. Use controles positivos apropriados, como células THP-1 estimuladas com citocinas (por exemplo, TNF ou IFN-gama) para aumentar a expressão de CLEC4D.
• Em imunofluorescência (IF-P), espera-se que o anticorpo detecte a CLEC4D localizada na membrana. A permeabilização é necessária se o epítopo for intracelular; caso contrário, a coloração de superfície em células vivas não fixadas pode ser avaliada.
• Para ELISA, certifique-se de que a proteína recombinante ou o antígeno nativo estejam devidamente revestidos e considere a reatividade cruzada com homólogos de camundongo e rato ao projetar os ensaios.
• Como acontece com qualquer anticorpo policlonal, a consistência lote a lote deve ser monitorada, e a especificidade pode ser verificada usando amostras de knockout ou knockdown de CLEC4D.

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