Anticorpo Policlonal Anti-Clusterina para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P10909

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Clusterina

• A Clusterina (apolipoproteína J, TRPM-2, SGP-2) é uma glicoproteína multifuncional codificada pelo gene CLU; existe em formas secretadas e intracelulares devido a processamento alternativo e pós-traducional.
• Como chaperona extracelular, a clusterina previne a agregação de proteínas não nativas e desnaturadas por estresse, inibe a formação de fibrilas amiloides e mantém proteínas parcialmente desdobradas para serem reenoveladas por outras chaperonas de maneira independente de ATP. Referências relacionadas: PMID:11123922, PMID:19535339, PMID:12176985, PMID:17260971, PMID:12047389, PMID:17407782, PMID:17412999
• A ligação da clusterina a receptores da superfície celular desencadeia a internalização e degradação lisossomal/proteassomal do complexo chaperona-cliente. Referências relacionadas: PMID:21505792
• Ela protege as células da citólise mediada pelo complemento, inibindo a montagem do complexo de ataque à membrana (MAC) através da prevenção da polimerização do C9. Referências relacionadas: PMID:2780565, PMID:1903064, PMID:2601725
• A clusterina intracelular interage com ligases E3 SCF para promover a ubiquitinação e degradação proteassomal de alvos como COMMD1 e IKBKB, e modula a atividade transcricional do NF-κB. Referências relacionadas: PMID:20068069, PMID:12882985
• Uma forma mitocondrial suprime a liberação de citocromo c dependente de BAX e estabiliza a integridade da membrana mitocondrial para inibir a apoptose. Referências relacionadas: PMID:16113678, PMID:17689225, PMID:22689054
• A localização subcelular inclui secreção em fluidos biológicos, bem como presença no citoplasma, núcleo, mitocôndrias, retículo endoplasmático e vesículas citoplasmáticas.
• A clusterina é expressa de forma ubíqua, com altos níveis no cérebro, testículo, ovário, fígado e pâncreas; detectada no plasma sanguíneo, líquido cefalorraquidiano, leite, plasma seminal e mucosa do cólon.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Devido à natureza policlonal e ao uso de um imunógeno recombinante, espera-se que este anticorpo detecte tanto as formas precursoras quanto as maduras da clusterina; inclua controles apropriados e marcadores de peso molecular.
• Para Western blotting, é recomendada a otimização do bloqueio e da diluição do anticorpo; considere executar SDS-PAGE redutora e não redutora devido à presença de ligações dissulfeto na clusterina.
• Em imuno-histoquímica e imunofluorescência, valide com amostras de tecido positivas e negativas conhecidas; a recuperação antigênica pode melhorar a detecção em cortes fixados em formol e embebidos em parafina.
• Como a clusterina é uma glicoproteína secretada, garanta lavagens rigorosas para reduzir o alto fundo em amostras contendo soro.
• A reatividade cruzada relatada com rato e rato permite o uso em modelos pré-clínicos comuns; no entanto, verifique a conservação do epítopo para comparações quantitativas.
• Sempre faça titulação do anticorpo em seu sistema de ensaio específico para determinar a diluição de trabalho ideal.

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