Anticorpo policlonal de coelho contra o fator X da coagulação (F10) para WB, IF/ICC, ELISA - P00742

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do fator X da coagulação

• O fator X (F10), também conhecido como fator Stuart ou fator Stuart-Prower, é uma glicoproteína dependente de vitamina K sintetizada no fígado e secretada no plasma como zimógeno.
• Após a ativação, o fator Xa converte a protrombina em trombina na presença do fator Va, cálcio e fosfolipídios, uma etapa crítica da cascata de coagulação. Referências relacionadas: PMID:22409427, PMID:39880037
• O fator Xa ativa os receptores ativados por protease (PARs) F2R, F2RL1 e F2RL2, desencadeando sinalização pró-inflamatória. Ele aumenta a expressão de PARs e estimula a produção de citocinas como MCP-1/CCL2, IL6, TNF, IL-1β, IL-8 e IL-18 em células endoteliais e tecidos cardíacos/atriais. Referências relacionadas: PMID:24041930, PMID:30568593, PMID:34831181, PMID:35738824, PMID:9780208
• O fator Xa induz a expressão de moléculas de adesão (ICAM1, VCAM1, SELE) e aumenta a ativação de ERK1/2 fosforilado e NF-κB, promovendo inflamação endotelial e um fenótipo pró-fibrótico nos tecidos atriais. Referências relacionadas: PMID:24041930, PMID:35738824, PMID:9780208
• Em fibroblastos dérmicos, o fator Xa promove a cicatrização de feridas por meio de um mecanismo dependente de PAR-2/F2RL1, intensificando as respostas pró-inflamatórias e pró-fibróticas. Referência relacionada: PMID:18202198
• O fator Xa também ativa a sinalização de proteção da barreira em células endoteliais por meio da clivagem de PAR-2/F2RL1 e aumenta a regulação do inibidor 1 do ativador do plasminogênio (SERPINE1) nos tecidos atriais. Referências relacionadas: PMID:22409427, PMID:24041930
• A proteína sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo γ-carboxilação dependente de vitamina K, hidroxilação e formação de múltiplas pontes dissulfeto em seus domínios semelhantes ao EGF, características da família das serina proteases.
• Palavras-chave: Coagulação sanguínea, hemostasia, hidrolase, serina protease, secretado, zimógeno, cálcio, domínio semelhante ao EGF, ácido gama-carboxiglutâmico, variante associada a doença.

Orientação experimental e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 235-488 do F10 humano, abrangendo parte do domínio catalítico. Espera-se que esse fragmento de proteína recombinante gere anticorpos que reconheçam tanto as formas zimogênica quanto ativa.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em torno de 55 kDa, mas observe que a glicosilação pode causar diferenças na migração. Considere validar em lisados de plasma ou tecido humanos e de camundongo relevantes.
• Para IF/ICC, os protocolos adequados de fixação e permeabilização devem ser otimizados para o tipo de célula-alvo. A natureza secretada do F10 pode exigir estimulação com ativadores da coagulação para sua detecção em cultura celular.
• Em aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; combine-o com um anticorpo monoclonal para desenvolver um ELISA sanduíche em pesquisas sobre hemostasia.
• Devido à reatividade cruzada com camundongo, este anticorpo pode ser útil em modelos murinos de trombose ou inflamação; no entanto, confirme a reatividade específica da espécie em seu sistema experimental.

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