Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-COCH para IHC-P, IF/ICC, ELISA - O43405

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do COCH

• A cocleína, também conhecida como COCH-5B2, é codificada pelo gene COCH em humanos e existe como múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• Atua na regulação da forma e da motilidade celular, particularmente na malha trabecular do olho.
• Predominantemente expressa nas estruturas do ouvido interno, incluindo a cóclea e o vestíbulo, onde é secretada para a matriz extracelular.
• A localização subcelular é principalmente extracelular, como componente da matriz extracelular, após a secreção.
• Contém um peptídeo sinal, ligações dissulfeto e sítios de glicosilação, indicando modificações pós-traducionais importantes para a sua estrutura e função.
• Mutações no gene COCH estão associadas à surdez sensorioneural autossómica dominante não sindrómica (DFNA9), destacando o seu papel crítico na audição.
• A proteína apresenta domínios vWFA (fator de von Willebrand tipo A) que medeiam interações proteína-proteína na matriz extracelular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange os aminoácidos 20–260 da cocleína humana, correspondendo à região N-terminal após o peptídeo sinal; esta região inclui o primeiro domínio vWFA e uma parte da sequência interveniente.
• Para IHC-P, recomendamos o uso de cortes de tecido do ouvido interno ou da malha trabecular humana fixados em formol e incluídos em parafina. A recuperação de antigénio com tampão citrato (pH 6,0) pode melhorar a coloração.
• Para IF/ICC, sugere-se a fixação com paraformaldeído a 4% seguida de permeabilização com Triton X-100. Titule o anticorpo para determinar a diluição de trabalho ideal.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou deteção; as concentrações de revestimento ideais e as diluições de deteção devem ser validadas empiricamente.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser confirmada para ensaios quantitativos.

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