Anti-COL10A1 (Cadeia alfa-1(X) de colagénio) Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, ELISA - Q03692

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do COL10A1 (Cadeia alfa-1(X) de colagénio)

• O COL10A1 codifica a cadeia alfa-1 do colagénio tipo X, uma proteína homotrimérica da matriz extracelular classificada como um colagénio de cadeia curta.
• Expresso principalmente por condrócitos hipertróficos, o colagénio tipo X é depositado na matriz extracelular da placa de crescimento e está associado a zonas de mineralização presumível durante a ossificação endocondral.
• Contém um domínio central de colagénio em hélice tripla flanqueado por um domínio N-terminal não colagénico (NC2) e um domínio C-terminal (NC1); o domínio NC1 é crítico para a trimerização e ligação de cálcio.
• O domínio NC1 exibe propriedades de ligação dependentes de cálcio, e a própria proteína tem interações com íons metálicos, apoiando o seu papel na calcificação da matriz.
• Modificações pós-traducionais incluem clivagem do peptídeo sinal, hidroxilação de prolina e hidroxilação/glicosilação de lisina, típicas da biossíntese de colagénio.
• Mutações no COL10A1 causam condrodisplasia metafisária de Schmid, um distúrbio esquelético autossómico dominante, sublinhando a sua importância na função da placa de crescimento e no crescimento ósseo linear.
• A localização subcelular é extracelular; após a secreção, a proteína torna-se parte da matriz extracelular da cartilagem.
• Palavras-chave: Colagénio, Matriz extracelular, Cálcio, Ligação de metal, Hidroxilação, Variante de doença, Repetição, Secretado, Sinal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio compreende os aminoácidos 1‑100 do COL10A1 humano; a reatividade do anticorpo pode ser dirigida contra epítopos na região N‑terminal. Valide a ligação no sistema de amostra relevante, pois o alvo pode sofrer processamento.
• Para western blotting, a massa prevista da proteína de comprimento total é de ~66 kDa; no entanto, formas de pró-colagénio e fragmentos proteolíticos podem ser detetados. Considere o uso de agentes redutores e otimize a preparação da amostra para proteínas da matriz extracelular.
• Em ELISA, confirme a especificidade usando proteína recombinante ou peptídeo imunogénico como controlo positivo. As condições de revestimento da placa podem requerer otimização para antigénios baseados em colagénio.
• Lisados de condrócitos hipertróficos ou amostras derivadas da cartilagem servem como controlos positivos apropriados; esteja ciente da expressão limitada fora da cartilagem da placa de crescimento.

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