Anticorpo Monoclonal Anti-COL11A1 para WB, IF/ICC, ELISA - P12107

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do COL11A1

• O COL11A1 codifica a cadeia alfa-1 do colágeno tipo XI, um colágeno fibrilar menor que desempenha um papel crucial na montagem e manutenção da matriz extracelular da cartilagem, regulando o crescimento lateral das fibrilas de colágeno II.
• A proteína é secretada e localiza-se no espaço extracelular e na matriz extracelular (UniProt: P12107).
• Apresenta expressão específica de tecido: abundante na cartilagem, placenta e em algumas linhas celulares tumorais ou transformadas viralmente. O splicing alternativo gera isoformas com o exão IIA ou IIB na cartilagem, enquanto o tendão expressa apenas a isoforma do exão IIB.
• O COL11A1 sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação e hidroxilação, e contém ligações dissulfureto e sítios de ligação ao cálcio, contribuindo para a sua estabilidade estrutural.
• Mutações no COL11A1 estão associadas a um espectro de doenças do tecido conjuntivo, incluindo síndrome de Stickler, surdez não sindrómica (DFNA37), catarata, nanismo e displasia ectodérmica.
• A proteína tem um peso molecular previsto de aproximadamente 181 kDa, mas múltiplas isoformas e eventos de processamento produzem variantes que variam de 167 a 182 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde a uma sequência peptídica específica (aa 301–400); confirme a conservação deste epítopo se estender o uso para outras espécies ou isoformas.
• Para Western blotting, utilize um gel de SDS-PAGE com baixa percentagem (ex: 6–8%) e condições de transferência otimizadas para proteínas de alto peso molecular; múltiplas bandas podem refletir a diversidade de isoformas.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica, inclua etapas de permeabilização para aceder ao colágeno localizado na matriz extracelular e valide com marcadores específicos da matriz.
• Para ELISA, considere usar um formato sanduíche com um par combinado ou otimize as condições de revestimento devido à natureza grande e glicosilada do antigénio.
• A preparação da amostra para extração de colágeno de tecido muitas vezes beneficia de tratamentos com pepsina ou outras proteases para libertar fibrilas intactas; note que isto pode alterar epítopos.

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