Anticorpo Policloonal Anti-COL11A1 para WB, IHC-P, ELISA - P12107

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da COL11A1

• A cadeia do colágeno alfa-1(XI) é um componente do colágeno tipo XI, um colágeno fibrilar menor essencial para a integridade estrutural da matriz extracelular da cartilagem.
• Desempenha um papel importante na fibrilogênese, controlando o crescimento lateral das fibrilas de colágeno tipo II, regulando assim o diâmetro da fibrila.
• Subcelularmente, está localizado no espaço extracelular secretado e na matriz, o que é consistente com seu papel na estruturação tecidual.
• Especificidade tecidual: Altamente expressa na cartilagem, placenta e algumas linhagens celulares tumorais ou transformadas viralmente. As isoformas que usam o éxon IIA ou IIB são predominantes na cartilagem, enquanto as isoformas que usam apenas o éxon IIB são encontradas no tendão.
• As modificações pós-traducionais incluem hidroxilação de resíduos de prolina e lisina, glicosilação e formação de pontes dissulfeto, que são críticas para a estabilidade da tripla hélice e a montagem supramolecular.
• Contém repetições colagenosas (Gly-X-Y) e domínios não colagenosos, com splicing alternativo gerando múltiplas isoformas que ajustam finamente as interações com a matriz.
• Variantes genéticas na COL11A1 estão ligadas à síndrome de Stickler, síndrome de Marshall e perda auditiva não sindrômica, destacando seu papel no desenvolvimento ocular, auditivo e esquelético.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 260–430 da região da tripla hélice, que é conservada entre as isoformas; a natureza policlonal pode reconhecer tanto variantes de comprimento completo quanto as spliceadas.
• Para Western blotting, considere um sistema de gel redutor ou não redutor, pois as pontes dissulfeto nos domínios não colagenosos podem afetar a migração; o peso molecular previsto é de ~181 kDa, mas a migração real pode diferir devido a modificações pós-traducionais.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno como digestão enzimática (por exemplo, pepsina) ou recuperação induzida por calor podem melhorar a detecção de epítopos de colágeno em cortes de cartilagem embebidos em parafina.
• Para ELISA, recomenda-se a realização de titulações prévias em tabuleiro de xadrez com COL11A1 recombinante ou extratos teciduais para estabelecer condições ideais de revestimento e detecção.
• Ao trabalhar com amostras de roedores, valide a reatividade cruzada inicialmente devido a possíveis diferenças nos padrões de expressão de isoformas entre tecidos humanos, de camundongo e de rato.

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