Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-COL2A1 para WB, ELISA - P28481

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do COL2A1

• A cadeia de colagénio alfa-1(II) (COL2A1), também conhecida como colagénio tipo II alfa-1, é um colagénio fibrilar principal e o colagénio predominante na cartilagem. É codificada pelo gene Col2a1 em camundongos e representa a forma homotrimérica do colagénio tipo II.
• O colagénio tipo II é essencial para o desenvolvimento embrionário normal do esqueleto, suportando o crescimento linear e fornecendo a estrutura que permite à cartilagem resistir a forças compressivas, uma propriedade crítica para a função articular e integridade dos tecidos.
• A proteína é membro da superfamília dos colagénios, caracterizada pelo seu domínio de hélice tripla composto por motivos repetitivos Gly-X-Y, onde X é frequentemente prolina e Y é hidroxiprolina, conferindo estabilidade mecânica única.
• O COL2A1 é secretado e localizado na matriz extracelular de tecidos cartilaginosos, onde interage com outros componentes da matriz, como proteoglicanos e colagénios menores, para formar uma rede altamente organizada.
• Modificações pós-traducionais, incluindo hidroxilação, glicosilação e formação de ligações dissulfeto, são críticas para a estabilidade da sua hélice tripla e montagem em fibrilas de colagénio maduras. A proteína também liga cálcio, o que pode influenciar a formação de fibrilas e a mineralização da matriz.
• A especificidade tecidual é restrita à cartilagem, tornando o COL2A1 um marcador chave para a diferenciação de condrócitos e pesquisa de biologia da cartilagem. Mutações ou expressão aberrante estão ligadas a displasias esqueléticas e osteoartrite.
• A proteína sofre splicing alternativo, gerando isoformas que podem ter papéis distintos no desenvolvimento e doença, embora a forma de comprimento total seja a mais abundante na cartilagem saudável.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante correspondente aos aminoácidos 1331-1487 da região C-terminal do COL2A1 de camundongo, o que pode conferir reatividade com a proteína nativa em amostras de camundongo e rato; considere verificar a especificidade nas espécies de interesse.
• Para Western blot (WB) em condições redutoras, espera-se uma banda na faixa de 132-142 kDa (aproximadamente 142 kDa previstos a partir da sequência de camundongo) em lisados de cartilagem; note que o colagénio tipo II pode formar oligómeros de ordem superior, pelo que é recomendado otimizar a preparação da amostra e os controles de carga.
• O desempenho em ELISA pode ser melhorado usando a mesma proteína recombinante como antígeno de revestimento; os utilizadores devem validar a titulação do anticorpo e as condições de deteção no seu formato de ensaio específico.
• Como este é um anticorpo policlonal, podem ocorrer ligeiras variações de lote para lote; é aconselhável confirmar a sensibilidade e a reatividade cruzada em experiências piloto antes do uso em grande escala.

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