Anticorpo Policlonal Anti-COL4A4 para WB e ELISA - P53420

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da COL4A4

• A cadeia alfa-4(IV) do colágeno, codificada pelo gene COL4A4, é um componente estrutural principal do colágeno tipo IV, que forma uma rede de "malha de galinha" nas membranas basais junto com lamininas, proteoglicanos e entactina/nidogênio.
• Os heterotrímeros de colágeno tipo IV são constituídos por cadeias alfa; a alfa-4(IV) é tipicamente encontrada em combinação com as cadeias alfa-3(IV) e alfa-5(IV), formando redes essenciais em membranas basais especializadas.
• A proteína é secretada para a matriz extracelular e é um componente central das membranas basais glomerulares (MBG), desempenhando um papel estrutural crítico na filtração renal.
• A distribuição tecidual é maior em rim, calvária, neuroretina e músculo cardíaco; há menor expressão em cérebro, pulmão e timo; não é detectada em fígado, pele, íleo, pâncreas ou glândula adrenal (em nível proteico).
• No olho, a COL4A4 é expressa na membrana de Bruch, na membrana limitante interna, nas camadas retinianas e ao redor dos vasos sanguíneos, contribuindo para a integridade da membrana basal ocular.
• As modificações pós-traducionais incluem hidroxilação de resíduos de prolina e lisina, formação de pontes dissulfeto e glicosilação, essenciais para a estabilidade e função do colágeno.
• Mutações na COL4A4 estão associadas à síndrome de Alport, uma doença genética caracterizada por doença renal progressiva, perda auditiva e anomalias oculares.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região específica (aa 1573-1690) da COL4A4 humana; leve em consideração que o anticorpo pode reconhecer um epítopo linear dentro desse domínio e pode não detectar isoformas que não possuem essa região.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda principal de aproximadamente 164 kDa em lisados de tecido renal ou retinal humano; bandas adicionais podem refletir modificações pós-traducionais ou produtos de degradação.
• No ELISA, otimize a concentração de revestimento e a diluição do anticorpo usando um protocolo indireto padrão com a proteína recombinante COL4A4 ou extratos de tecido; inclua controles negativos apropriados.
• Valide a reatividade cruzada com outros membros da família do colágeno, se necessário, pois anticorpos policlonais podem exibir reatividade a domínios colagenosos conservados.

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