Anticorpo Policlonais Anti-COL4A5 para WB, IF/ICC, ELISA - P29400

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da COL4A5

• A cadeia alfa-5 do colágeno tipo IV funciona como o principal componente estrutural das membranas basais glomerulares (MBG), formando uma rede em formato de "malha de frango" com lamininas, proteoglicanas e entactina/nidógena.
• A proteína é secretada e se localiza no espaço extracelular, na matriz extracelular e nas membranas basais.
• A isoforma 2 apresenta expressão tecido-específica no rim.
• A COL4A5 está implicada na síndrome de Alport, uma doença genética caracterizada por insuficiência renal progressiva, surdez neurossensorial e anomalias oculares.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo hidroxilação e glicosilação, e forma ligações dissulfeto.
• Contém domínios colagenosos repetitivos típicos dos colágenos tipo IV, que contribuem para a formação de estruturas triplas helicoidais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 1462-1691) da COL4A5 humana, que se encontra dentro do domínio NC1. Este domínio participa da montagem do prótomo e pode ser bem apresentado em extratos nativos de membrana basal.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 161 kDa. Use um gel de poliacrilamida de baixa porcentagem (ex.: 6-8%) para facilitar a transferência desta proteína de alto peso molecular, e considere tempos de transferência mais longos.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, a COL4A5 se localiza nas membranas basais. Para uma coloração ideal, use secções de tecido congeladas ou impregnadas em parafina. Métodos de recuperação de antígeno podem ser necessários para secções de parafina; consulte a literatura para protocolos específicos.
• Aplicações de ELISA podem se beneficiar do uso de proteína COL4A5 recombinante ou extratos de membrana basal como antígeno de revestimento. Valide a especificidade do anticorpo com controles positivos e negativos apropriados.

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