Anticorpo policlonal de coelho anti-Colagénio I/COL1A1 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P02452

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do Colagénio I/COL1A1

• A cadeia alfa-1(I) do colagénio (COL1A1) é um componente principal do colagénio de tipo I, o colagénio formador de fibrilas mais abundante nos vertebrados. Pertence à família dos colagénios do grupo I.
• O colagénio de tipo I é um heterotrímero constituído por duas cadeias alfa-1(I) e uma cadeia alfa-2(I), formando o principal elemento estrutural da matriz extracelular (ECM) nos tecidos conjuntivos.
• A proteína é secretada para o espaço extracelular e depositada na ECM, onde sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo hidroxilação, glicosilação e formação de pontes dissulfureto, para se organizar em fibrilas maduras.
• A distribuição tecidular ocorre predominantemente nos tendões, ligamentos e ossos; no osso, as fibrilas de colagénio são mineralizadas com hidroxiapatite de cálcio, proporcionando resistência à tração e integridade estrutural.
• O splicing alternativo e o processamento proteolítico geram múltiplas isoformas; as mutações no COL1A1 estão associadas a doenças do tecido conjuntivo, como a osteogénese imperfeita, a síndrome de Ehlers-Danlos e certas formas de nanismo.
• Entre as características adicionais anotadas incluem-se a ligação a metais (cálcio), resíduos fosforilados e uma modificação por ácido pirrolidona carboxílico no terminal N, refletindo a regulação complexa da sua maturação e função.

Orientação experimental e dicas técnicas

• O imunogénio é um péptido sintético correspondente aos resíduos 1151–1250 do COL1A1 humano (NP_000079.2), uma região próxima do terminal C. Este design pode favorecer a deteção do pró-colagénio de comprimento completo ou das cadeias de colagénio maduras, dependendo do processamento da amostra.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 139 kDa; as condições redutoras podem ajudar a resolver os monómeros de colagénio, enquanto as condições não redutoras preservam os oligómeros de ordem superior. Em lisados tecidulares, considere um pré-tratamento com colagenase para confirmar a especificidade.
• Na imunofluorescência (IF/ICC) e na imuno-histoquímica (IHC-P), o colagénio encontra-se predominantemente no espaço extracelular; pode ser necessária uma permeabilização adequada (por exemplo, com Triton X-100) e recuperação antigénica (para cortes incluídos em parafina). A coloração conjunta com marcadores da ECM ou a deteção em cortes de osso descalcificado pode fornecer uma validação adicional.
• Para aplicações de ELISA, podem ser explorados formatos diretos ou em sanduíche. O revestimento com péptido ou a captura por um segundo anticorpo pode melhorar a sensibilidade ao trabalhar com matrizes biológicas complexas, como soro ou extratos de tecidos.

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