Anticorpo Policlonal Anti-Colágeno I/COL1A2 para WB, IF/ICC, ELISA - P08123

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Cadeia Alfa-2(I) do Colágeno

• A cadeia alfa-2(I) do colágeno é uma subunidade do colágeno tipo I, o colágeno fibrilar mais abundante no corpo humano, conferindo resistência à tração aos tecidos conjuntivos.
• Juntamente com duas cadeias alfa-1(I), forma a molécula de pró-colágeno tipo I heterotrimérica, que sofre processamento proteolítico para se montar em fibrilas de colágeno maduras.
• O colágeno tipo I é um componente estrutural principal da matriz extracelular na pele, osso, tendões, ligamentos e outros tecidos conjuntivos, onde se organiza em fibrilas que são mineralizadas com hidroxiapatita de cálcio nos ossos.
• A proteína é sintetizada como uma pré-pró-proteína com um peptídeo sinal, e a cadeia madura é secretada no espaço extracelular, contribuindo para a montagem supramolecular das fibras de colágeno.
• Expressão específica de tecido: altamente expressa em tendão, ligamento e osso, com a organização das fibrilas sendo crítica para as propriedades biomecânicas; mutações no COL1A2 causam osteogênese imperfeita e síndrome de Ehlers-Danlos.
• Modificações pós-traducionais incluem hidroxilação de resíduos de prolina e lisina, glicosilação e formação de pontes dissulfeto, que são essenciais para a estabilidade da tripla hélice e a ligação cruzada das fibrilas.
• A proteína contém um grande domínio de tripla hélice com repetições características de Gly-X-Y, onde X é frequentemente prolina e Y é frequentemente hidroxiprolina, e desempenha um papel na adesão celular via sítios de ligação à integrina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região C-terminal (aa 1161-1260) do COL1A2 humano, que pode reconhecer tanto a forma pró quanto o colágeno maduro; valide em seu sistema de amostra.
• Para Western blot, use condições de SDS-PAGE redutoras para dissociar os trímeros de colágeno; observe que o peso molecular teórico da cadeia pró-alfa-2 é ~129 kDa, mas as formas processadas maduras podem aparecer menores.
• Ao realizar imunofluorescência (IF/ICC), considere que o colágeno é secretado; se for marcar o pró-colágeno intracelular, inclua etapas de permeabilização e co-localize com marcadores de ER/Golgi.
• Aplicações de ELISA podem ser usadas para detectar fragmentos de colágeno solúveis ou colágeno secretado em sobrenadantes de cultura celular; otimize as condições de revestimento e detecção para sua matriz.
• O anticorpo reage de forma cruzada com camundongo e rato, apoiando estudos translacionais em modelos animais de fibrose, doenças ósseas e cicatrização de feridas.

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