Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fator D do Complemento para WB, ELISA - P00746

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fator D do Complemento

• O fator D do complemento (CFD), também designado Adipsina, ativador da convertase C3 ou fator D da properdina, é uma serina protease que atua como a enzima iniciadora da via alternativa do complemento, um componente crítico da imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:21205667, PMID:22362762, PMID:6769474
• Ele funciona clivando o fator B do complemento (CFB) quando o CFB está ligado ao C3b, formando assim a convertase C3 ativa (C3bBb) da via alternativa. Referências relacionadas: PMID:21205667, PMID:6769474, PMID:874324
• A via alternativa é iniciada pela hidrólise espontânea do complemento C3, e a ativação mediada pelo CFD gera convertases C3 e C5, que amplificam a cascata do complemento e promovem a opsonização, inflamação e lise de patógenos. Referências relacionadas: PMID:21205667, PMID:22362762, PMID:6769474
• O CFD é uma proteína secretada, liberada na corrente sanguínea e fluidos extracelulares, onde exerce sua função proteolítica.
• É sintetizado como uma pré-pró-proteína com um peptídeo sinal e um peptídeo de ativação; a enzima madura ativa é gerada pela remoção proteolítica do peptídeo de ativação. Estruturalmente, possui ligações dissulfeto canônicas características das serina proteases do tipo tripsina.
• Mutações no gene CFD estão ligadas a deficiências do complemento e maior suscetibilidade a infecções, destacando seu papel essencial na defesa imunológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno consiste em uma proteína de fusão recombinante abrangendo os aminoácidos 26–253 do CFD humano, que corresponde à enzima madura e ativa. Portanto, espera-se que o anticorpo reconheça tanto a forma pró quanto a protease ativa.
• Na análise de Western blot (WB), é esperada uma banda específica em aproximadamente 27 kDa em condições redutoras. Condições não redutoras podem revelar multímeros ligados por dissulfeto ou variantes conformacionais; considere testar ambas as condições.
• Para aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado como um reagente de captura ou detecção para CFD em fluidos biológicos como soro ou plasma. Os pares de anticorpos e concentrações ideais devem ser determinados empiricamente.
• Devido à natureza secretada do CFD, o preparo da amostra pode exigir atenção para evitar degradação; adicionar inibidores de protease e processar as amostras em baixas temperaturas é aconselhável.

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