Anticorpo policlonal de coelho anti-Connexina 43 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P17302

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Connexina 43

• A proteína alfa-1 das junções comunicantes, comumente conhecida como Connexina-43 (Cx43), é codificada pelo gene GJA1. Ela pertence à família de genes das conexinas e é a principal proteína das junções comunicantes em muitos tecidos.
• A Cx43 se hexameriza para formar conexons que se acoplam frente a frente às estruturas correspondentes em células adjacentes, criando canais intercelulares que permitem a difusão passiva de íons e pequenos metabólitos. Essa comunicação direta entre células é essencial para a sincronização dos tecidos e a homeostase.
• No sistema cardiovascular, a Cx43 é altamente expressa nos discos intercalares dos cardiomiócitos e é fundamental para a morfogênese cardíaca, a condução elétrica e a contração coordenada. Referências relacionadas: PMID:11741837, PMID:18662195, PMID:38375917
• Além da função básica de canal, a Cx43 desempenha um papel fundamental na imunidade antiviral inata. Ela forma canais que transferem 2',3'-cGAMP e 2',5'-oligoadenilatos de células infectadas por vírus para células vizinhas e macrófagos, propagando e amplificando assim a resposta do interferon do tipo I. Referências relacionadas: PMID:24077100, PMID:31992625, PMID:40010341
• Subcelularmente, a Cx43 está principalmente localizada na membrana plasmática, nas placas de junções comunicantes, mas uma parte também se localiza no retículo endoplasmático, provavelmente envolvida na montagem dos canais ou na sinalização.
• A Cx43 sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, S-nitrosilação e ubiquitinação, que regulam a abertura dos canais, o tráfego e a renovação.
• Os tecidos com alta expressão de Cx43 incluem o coração, a pele (queratinócitos) e a cóclea fetal, destacando seus papéis na condução cardíaca, na função de barreira epidérmica e na reciclagem de potássio relacionada à audição. Referências relacionadas: PMID:11741837, PMID:18662195, PMID:38375917, PMID:26604139
• Mutações patogênicas em GJA1 estão associadas a doenças autossômicas dominantes, como displasia oculodentodigital (ODDD), queratodermia palmoplantar com hipotricose e defeitos cardíacos congênitos sindrômicos, ressaltando a importância pleiotrópica da proteína.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Na análise por Western blot, o peso molecular teórico da Cx43 é de aproximadamente 43 kDa, mas podem ser observadas várias bandas, incluindo formas fosforiladas. Inclua controles positivos apropriados (por exemplo, lisado de tecido cardíaco) e controles negativos, e valide os resultados utilizando o sistema-modelo relevante.
• Para imunofluorescência e ICC, espere uma marcação puntiforme da membrana nas interfaces entre células. Como o imunógeno corresponde à extremidade C-terminal intracelular (aa 233-382), é necessária a permeabilização para permitir o acesso ao epítopo.
• Na IHC-P, as condições de recuperação antigênica devem ser otimizadas em tecidos conhecidos por expressarem Cx43, como coração ou pele. Considere utilizar o anticorpo em uma faixa de diluições para determinar a proporção sinal-ruído ideal.
• Foi relatado que este anticorpo apresenta reatividade cruzada com proteínas humanas, de camundongo e de rato. Para outras espécies, verifique a homologia da sequência da região do imunógeno antes do uso.
• O imunógeno recombinante abrange uma região conservada; portanto, o anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas ou homólogos da Cx43. Verifique a especificidade por meio de experimentos de knockdown ou knockout no tipo de célula ou tecido relevante.

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