PolymAb® de Coelho Anti-Connexina 43 para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P17302

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Connexina 43 (GJA1)

• A proteína junção gap alfa-1, também conhecida como Conexina-43 (Cx43), é codificada pelo gene GJA1. Ela é o componente estrutural das junções gap, formando canais intercelulares que permitem a troca direta de íons, metabólitos e pequenas moléculas de sinalização entre células adjacentes.
• Canais funcionais são connexons hexaméricos homotípicos e heterotípicos, regulados por tensão transjunccional. A Cx43 contribui para diversos processos fisiológicos, incluindo a reciclagem de potássio na cóclea (audição), a regulação da capacidade funcional da bexiga por meio da sensibilização a estímulos colinérgicos e a condução miocárdica ventricular adequada e a morfogênese cardíaca.
• É um regulador negativo do crescimento celular por meio da modulação da expressão e localização da NOV.
• Mediador crítico da sinalização imune inata intercelular: após infecção viral, os canais de Cx43 translocam os segundos mensageiros 2',3'-cGAMP e 2',5'-oligoadenilatos (2-5A) das células infectadas para macrófagos e vizinhas não infectadas, ampliando assim a resposta imune antiviral. Referências relacionadas: PMID:24077100 PMID:31992625 PMID:40010341
• Subcelularmente, está localizada predominantemente na membrana celular e nas placas de junções gap, com presença adicional no retículo endoplasmático.
• Expressão tecidual: abundante nos discos intercalados do músculo cardíaco, cóclea fetal e queratinócitos epidérmicos.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação, S-nitrosilação e ubiquitinação; estas modificam a montagem do canal, sua abertura e renovação. Está associada a doenças como displasia oculodentodigital, ceratodermia palmoplantar e catarata congênita.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 300–382 na cauda C-terminal da Cx43 humana. Esta região é citoplasmática e contém múltiplos sítios de fosforilação regulatórios; portanto, o anticorpo pode reconhecer múltiplas fosfoisoformas ou a Cx43 total dependendo do estado da proteína alvo.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda principal em torno de 43 kDa; no entanto, é conhecido que a Cx43 migra como múltiplas bandas devido à fosforilação, o que pode ser resolvido com preparação cuidadosa da amostra e eletroforese em gel.
• Em imunofluorescência (IF/ICC, IF-P), deve ser observada a coloração punctiforme de membrana típica de placas de junções gap. As condições de permeabilização e fixação podem precisar de otimização para o tipo específico de célula ou tecido.
• Para aplicações em ELISA, considere usar uma proteína Cx43 recombinante ou um peptídeo que compreenda a sequência do imunógeno como controle positivo para validar a ligação do anticorpo.

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