Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-COPB2 para WB, IF/ICC, ELISA - P35606

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do COPB2

• O COPB2 codifica a subunidade beta'-COP do coatômero (proteína de revestimento beta', p102), um componente central do complexo coatômero COPI envolvido no tráfego vesicular intracelular.
• O complexo coatômero liga-se a motivos dilisina e associa-se reversivelmente a vesículas não revestidas por clatrina do Golgi, mediando o transporte proteico biossintético do RE através do Golgi para a rede trans-Golgi.
• O COPB2 é essencial para o brotamento do Golgi e para o transporte retrógrado do Golgi para o RE de proteínas marcadas com dilisina, mantendo a integridade estrutural do Golgi e regulando o processamento, a atividade e a reciclagem endocítica dos receptores de LDL.
• O COPB2 funciona como uma proteína de ligação seletiva (RACK) para a proteína quinase C tipo epsilon, conectando o tráfego de membranas com a sinalização celular através da ligação dependente de GTP a membranas do Golgi.
• A proteína localiza-se predominantemente no citoplasma, na membrana do aparelho de Golgi e nas membranas das vesículas revestidas por COPI, ressaltando seu papel na formação de vesículas COPI e na triagem de carga.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem modular a montagem do coatômero, sua estabilidade ou interações com carga e fatores regulatórios.
• Mutações no COPB2 estão associadas à microcefalia primária (MCPH19) e à osteoporose, destacando seus papéis essenciais na divisão celular e na homeostase óssea.
• A proteína contém domínios de repetição WD, permitindo interações proteína-proteína críticas para a integridade e função do complexo coatômero.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 657-906) abrange a região C-terminal de repetição WD; considere que o anticorpo pode reconhecer motivos estruturais conservados ao avaliar a reatividade cruzada entre espécies.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 102 kDa; use uma porcentagem de gel apropriada (ex.: SDS-PAGE a 8%) e otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Na imunofluorescência/ICC, espere um padrão de marcação perinuclear, semelhante ao do Golgi; a co-marcação com um marcador do Golgi cis (ex.: GM130) é recomendada para validação.
• Para ELISA, utilize o imunógeno recombinante como controle positivo e padronize as condições do ensaio com tampões de bloqueio e lavagem adequados.
• Verifique a especificidade do anticorpo usando lisados de células com knockout ou knockdown de COPB2, se disponíveis, uma vez que o COPB2 é essencial e sua depleção pode afetar a viabilidade celular.
• Para preservar a atividade do anticorpo, alíquote e armazene a -20°C ou menos; evite ciclos repetidos de congelamento-descongelamento e exposição prolongada à temperatura ambiente (enviado em bolsa de gelo).

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