Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-COX IV para WB, IHC-P, ELISA - P13073

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do COX IV

• A subunidade 1 isoforma da citocromo c oxidase (COX IV-1) é uma subunidade codificada no núcleo do complexo IV (citocromo c oxidase), a enzima terminal da cadeia de transporte de elétrons mitocondrial.
• Desempenha um papel crítico na fosforilação oxidativa, contribuindo para a montagem e regulação da holoenzima, que catalisa a redução do oxigênio molecular em água.
• A enzima acopla a transferência de elétrons da citocromo c para o oxigênio com o translocamento de prótons através da membrana mitocondrial interna, gerando o gradiente de prótons essencial para a síntese de ATP.
• O COX IV-1 é codificado pelo gene COX4I1 e é expresso ubiquamente em tecidos humanos, com um peso molecular de aproximadamente 19,5 kDa para a proteína madura.
• A proteína está ancorada na membrana interna mitocondrial e é sintetizada com um peptídeo de trânsito clivável que direciona a importação mitocondrial.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem modular a atividade e a montagem do complexo IV.
• Mutações no COX4I1 estão ligadas à deficiência do complexo IV mitocondrial, tipo nuclear 16 (MC4DN16), uma doença multissistêmica grave.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado (peptídeo N-terminal dentro dos aminoácidos 1–100) sugere o reconhecimento de epítopo em uma região conservada entre humano, camundongo e rato, apoiando a reatividade cruzada observada. Considere isso ao projetar ensaios de detecção específicos de isoformas.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto do COX IV é de ~20 kDa; valide a detecção usando lisados de controle positivo apropriados (por exemplo, frações mitocondriais de HeLa, HEK293 ou fígado de roedores).
• Em imuno-histoquímica (parafina), métodos padrão de recuperação de antígeno (tampão citrato, pH 6,0, ou EDTA, pH 9,0) e bloqueio de peroxidase endógena devem ser aplicados; padrões de expressão específicos do tecido podem exigir otimização.
• Ao realizar ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção para COX IV nativo ou recombinante; a reatividade cruzada com o holocomplexo do complexo IV ou submontagens pode influenciar o design do ensaio — a validação empírica é recomendada.
• Sempre inclua controles pareados por espécie e, se estiver estudando modelos de doença, confirme a presença de mutações que possam alterar a acessibilidade do epítopo.

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