Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-COX2/PTGS2 para WB, IHC-P, ELISA - P35354

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da COX2/PTGS2

• COX2/PTGS2 (Prostaglandina G/H sintase 2) é uma enzima indutível de função dupla que catalisa a ciclooxigenação do ácido araquidônico em prostaglandina G2 (PGG2) e sua peroxidação subsequente em prostaglandina H2 (PGH2), o precursor central de todos os prostanoides. Referências relacionadas: PMID:16373578 PMID:22942274 PMID:26859324
• Além do araquidonato, a COX2 oxigena outros ácidos graxos poliinsaturados, como o ácido dihomo-γ-linolênico (DGLA) e o ácido eicosapentaenoico (EPA), para produzir séries alternativas de prostanoides, contribuindo para diversos perfis de mediadores lipídicos. Referências relacionadas: PMID:11939906 PMID:19540099
• Além da síntese clássica de prostanoides, a COX2 participa da geração de mediadores especializados pró-resolução (SPMs), incluindo resolvinas da série D derivadas do ácido docosahexaenóico (DHA) e resolvinas da série E derivadas do EPA, desempenhando um papel fundamental na resolução da inflamação. Referências relacionadas: PMID:12391014 PMID:21206090
• A COX2 está predominantemente localizada nas membranas do retículo endoplasmático, microssomos e nas membranas nucleares interna e externa, posicionando-a em sítios intracelulares chave para a sinalização de eicosanoides.
• A enzima requer heme e cofatores de ferro para suas atividades duplas e está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, S-nitrosilação e formação de pontes dissulfeto, que podem regular sua função.
• A COX2 metaboliza o 2-arachidonoilglicerol em ésteres de glicerila de prostanoides, um processo associado à percepção da dor, e também pode oxigenar o ácido linoleico em hidrooctadecadienoatos (HODEs). Referências relacionadas: PMID:22942274

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado contra a região C-terminal (aa 505-604) da COX2 humana, uma área com alta homologia de sequência entre humano, camundongo e rato, o que é consistente com a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~69 kDa; garanta uma porcentagem de gel adequada e condições de transferência corretas. Valide com controles positivos apropriados (ex.: lisados de células induzidas para COX2) e considere a natureza indutível da proteína.
• Em IHC-P, a recuperação de antígeno pode ser necessária; otimize as condições de recuperação para o seu tecido específico e método de fixação. Recomenda-se a inclusão de controles positivos (ex.: tecido inflamado) e negativos (baixa expressão de COX2).
• Para ELISA, confirme o reconhecimento do epítopo peptídico no formato do seu ensaio e considere usar a proteína COX2 recombinante ou o peptídeo como padrão, se disponível.

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