Anticorpo Monoclonal Anti-COX5B para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10606

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da COX5B

• A COX5B, também conhecida como subunidade 5B da citocromo c oxidase ou COXVB, é um componente codificado no núcleo do complexo IV (citocromo c oxidase) da cadeia de transporte de elétrons mitocondrial.
• Ela catalisa a redução terminal do oxigênio molecular em água, acoplando a transferência de elétrons ao bombeamento de prótons através da membrana mitocondrial interna para impulsionar a síntese de ATP.
• A proteína se localiza especificamente na membrana interna mitocondrial, onde se associa com outras subunidades da holoenzima citocromo c oxidase.
• Junto com os complexos II e III, a COX5B contribui para a cadeia respiratória que transfere elétrons do NADH e succinato para o oxigênio, estabelecendo um gradiente eletroquímico.
• O sítio ativo da citocromo c oxidase inclui hemo A3 e cobre B (CuB), com a COX5B desempenhando um papel estrutural na manutenção da integridade e função do centro binuclear.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, e a proteína se liga a um íon zinco (ligação a metais), conforme identificado por proteômica e sequenciamento proteico direto.
• A proteína madura (após clivagem do peptídeo de trânsito mitocondrial) tem um peso molecular de aproximadamente 14 kDa, correspondendo à maior parte da subunidade madura.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 29–129 da COX5B humana, uma região que corresponde à proteína madura após a remoção da sequência de direcionamento mitocondrial; esse design aumenta o reconhecimento da forma processada endógena.
• Para Western blotting (WB), considere usar condições redutoras e extratos proteicos enriquecidos em mitocôndrias para maximizar a detecção da banda de ~14 kDa.
• Em imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), a coloração para COX5B normalmente exibe um padrão mitocondrial pontilhado; valide com marcadores de organelas para confirmar a localização.
• O anticorpo reage de forma cruzada com a COX5B de camundongo e rato; verifique a reatividade nos lisados de células ou tecidos da espécie relevante, pois a homologia de sequência na região do imunógeno pode variar.
• Para aplicações de ELISA, otimize as condições de revestimento e as diluições do anticorpo usando COX5B recombinante ou frações mitocondriais de amostras humanas, de camundongo ou de rato.
• Como anticorpo monoclonal, ele é adequado para um desempenho consistente entre lotes; no entanto, cada nova aplicação deve ser titulada e validada no sistema de amostra pretendido.

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