Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-COX8A para WB e ELISA - P10176

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Subunidade 8A do Citocromo c Oxidase

• COX8A codifica a subunidade 8A do citocromo c oxidase, um polipeptídeo codificado nuclearmente do complexo IV da cadeia respiratória mitocondrial (também conhecido como polipeptídeo VIII-fígado/coração do citocromo c oxidase e COX8-2).
• Como componente do citocromo c oxidase (complexo IV), catalisa a redução terminal do oxigênio em água na cadeia de transporte de elétrons, acoplando a transferência de elétrons à translocação de prótons através da membrana mitocondrial interna para impulsionar a síntese de ATP.
• O gene COX8A pertence a uma família de subunidades codificadas nuclearmente que modulam estruturalmente o núcleo catalítico do complexo IV; isoformas alternativas podem surgir de genes distintos, como o COX8C.
• A proteína se localiza na membrana mitocondrial interna através de uma hélice transmembrana; é sintetizada como um precursor com um peptídeo de trânsito N-terminal que é clivado durante a importação mitocondrial para produzir a forma madura de ~8 kDa.
• A ubiquitinação (conjugação Ubl) foi identificada como uma modificação pós-traducional, potencialmente regulando a estabilidade da COX8A ou sua montagem no complexo.
• Mutações em COX8A estão ligadas a doenças mitocondriais primárias, especificamente à deficiência nuclear do complexo IV mitocondrial tipo 15 (MC4DN15), destacando seu papel essencial na fosforilação oxidativa.
• Amplamente expresso em tecidos humanos, o COX8A suporta a função de manutenção da respiração mitocondrial em diversos tipos celulares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos 69 aminoácidos N-terminais da COX8A humana; considere usar lisados enriquecidos com mitocôndrias para melhorar a sensibilidade de detecção para esta proteína de baixa abundância da membrana interna.
• Para Western blotting, use um gel de alta porcentagem (ex.: 15% ou gradiente) adequado para resolver proteínas de ~8 kDa e valide a banda em relação ao peso molecular previsto (UniProt: 7579 Da) com marcadores mitocondriais.
• Em aplicações de ELISA, a natureza policlonal permite o reconhecimento de múltiplos epítopos; realize titulações em damas para determinar as concentrações ótimas de revestimento de anticorpo e antígeno.
• A reatividade cruzada com humano e rato está indicada; para outras espécies, alinhe a sequência do imunógeno com a proteína alvo para prever a reatividade antes do uso experimental.
• Dada a localização mitocondrial, pré-tratar amostras com detergentes suaves pode melhorar a acessibilidade do epítopo, embora testes empíricos sejam aconselhados.

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