Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CPS1 para WB, IF/ICC, ELISA - P31327

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CPS1

• A CPS1 (Carbamoil-fosfato sintase [amônia], mitocondrial) é uma enzima chave do ciclo da ureia que catalisa a síntese dependente de ATP de carbamoil fosfato a partir de amônia e bicarbonato, essencial para a desintoxicação de amônia em animais ureotélicos.
• A proteína é expressa principalmente no fígado e no intestino delgado, consistente com seu papel central no metabolismo do nitrogênio.
• A CPS1 localiza-se predominantemente na matriz mitocondrial, mas também foi detectada no núcleo, nucléolo e membrana celular, sugerindo funções não canônicas adicionais.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e glicosilação, são relatadas, o que pode regular a atividade ou localização da enzima.
• A CPS1 é uma enzima alostérica e um membro da família das ligases, contendo sítios de ligação de ATP críticos para sua função catalítica.
• O splicing alternativo produz múltiplos isoformas, e mutações na CPS1 causam deficiência de carbamoil fosfato sintetase I, um distúrbio grave do ciclo da ureia.
• Uma estrutura 3D resolvida fornece insights sobre a arquitetura de domínio e os mecanismos regulatórios da enzima.
• A proteína madura tem um peso molecular de aproximadamente 165 kDa (UniProt: 164.939 Da).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região central (aa 750-970) da CPS1 humana, visando uma área potencialmente conservada entre espécies; verifique a reatividade cruzada em seu sistema de amostra específico.
• Para Western blot (WB), espere uma banda em torno de 165 kDa; use marcadores de peso molecular apropriados e considere controles de carga, como GAPDH ou beta-actina, para normalização.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), otimize a fixação (por exemplo, PFA a 4%) e a permeabilização (por exemplo, Triton X-100 a 0,1%) para detectar a localização mitocondrial; faça co-coloração com marcadores mitocondriais, se necessário.
• Em aplicações de ELISA, faça titulação do anticorpo e use um antígeno de revestimento adequado; o imunógeno recombinante pode servir como controle positivo.

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