Anticorpo policlonal de coelho Anti-CRACR2A para WB, IHC-P, ELISA - Q9BSW2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CRACR2A

• CRACR2A, também conhecido como proteína 4B contendo domínio de ligação ao cálcio do tipo EF-hand (EFCAB4B) ou proteína relacionada a Ras Rab-46 (RAB46), é uma proteína de ligação ao cálcio com atividade GTPase que desempenha papéis duais na entrada de cálcio operada por armazenamento (SOCE) e no tráfego intracelular. Referências relacionadas: PMID:27016526
• Em linfócitos T, CRACR2A funciona como um sensor de cálcio citoplasmático que facilita a agregação de ORAI1 e STIM1 nas junções entre o retículo endoplasmático e a membrana plasmática, promovendo a ativação do canal CRAC. Após o influxo de cálcio, ele se dissocia do complexo para regular a estabilidade do canal. Referências relacionadas: PMID:27016526
• Como Rab GTPase, CRACR2A medeia o transporte retrógrado de corpos de Weibel-Palade (WPBs) para o centro organizador de microtúbulos (MTOC) em células endoteliais em resposta à estimulação com histamina, agindo de forma independente do cálcio. Referências relacionadas: PMID:31092558
• CRACR2A também funciona como uma proteína adaptadora de dineína regulada por cálcio, ativando o transporte mediado por dineína e regulando o tráfego endossômico de CD47. Referências relacionadas: PMID:30814157
• Ele conecta as vias de sinalização do TCR ao se localizar na sinapse imunológica após a ativação de linfócitos T, onde interage com VAV1 para ativar as cascatas de sinalização Ca2+-NFAT e JNK a jusante. Referências relacionadas: PMID:27016526
• Subcelularmente, CRACR2A é encontrado no citoplasma, na membrana plasmática, no aparelho de Golgi, na rede trans-Golgi e está associado a vesículas e ao centro organizador de microtúbulos. Sua localização muda dependendo do estado de ativação e do tipo de célula.
• A expressão tecidual inclui linhagens de linfócitos T como Jurkat e células endoteliais, com localização específica nos corpos de Weibel-Palade em células endoteliais. Referências relacionadas: PMID:25475730, PMID:31092558, PMID:27016526, PMID:30814157
• A proteína contém domínios EF-hand para ligação ao cálcio, um domínio GTPase e sofre prenilação (como indicado pelas palavras-chave), sugerindo associação com membranas. Existem múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1-200) de CRACR2A humana, que pode direcionar epitopos conservados entre as isoformas. Recomenda-se verificar a detecção isoforma-específica no seu sistema experimental.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 83 kDa. Ao analisar CRACR2A endógeno, preste atenção a possíveis modificações pós-traducionais ou variantes de splicing que podem alterar a migração.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígeno devem ser otimizadas para o tecido específico e a ligação do anticorpo. Valide os padrões de coloração usando controles positivos (por exemplo, tecidos ricos em linfócitos T) e negativos apropriados.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com amostras de camundongo de acordo com as especificações do fornecedor, mas recomendamos validar a especificidade em tecidos ou linhagens celulares de camundongo antes do uso.
• Para aplicações em ELISA, considere usar um sistema de detecção secundário compatível com anticorpos policlonais de coelho; titule o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal.

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