Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CRBN para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q96SW2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CRBN

• A proteína cereblona (CRBN), codificada pelo gene CRBN, também é conhecida como MRT2 ou MRT2A. Funciona como o componente de reconhecimento de substrato do complexo E3 ubiquitina ligase DCX (DDB1-CUL4-X-box), direcionando proteínas específicas para ubiquitinação e subsequente degradação proteassomal. Referências relacionadas: PMID:26990986, PMID:33009960
• Através da sua atividade de ubiquitina ligase, a CRBN regula processos-chave de desenvolvimento e sinalização. É essencial para o crescimento normal dos membros mediado pelo fator de crescimento de fibroblastos FGF8, como mostrado em estudos que ligam mutações da CRBN a defeitos congénitos dos membros. Referências relacionadas: PMID:20223979, PMID:24328678, PMID:25043012
• No sistema nervoso, a CRBN mantém funções cognitivas como memória e aprendizagem, regulando negativamente os canais de potássio ativados por cálcio de grande condutância (BK). Interage com o KCNT1 para controlar a montagem do canal BK e a expressão na superfície neuronal, influenciando a libertação de glutamato pré-sináptica. Referências relacionadas: PMID:18414909, PMID:29530986
• A CRBN também desempenha um papel regulador negativo na imunidade inata, inibindo a sinalização do recetor do tipo Toll 4 (TLR4). Liga-se ao TRAF6 e ao ECSIT, bloqueando a ubiquitinação do ECSIT, um passo crítico na transdução de sinal do TLR4. Referências relacionadas: PMID:31620128
• Subcelularmente, a CRBN é encontrada no citoplasma, núcleo e associada à membrana. É amplamente expressa em vários tecidos, mas mostra maior expressão no cérebro.
• Características adicionais incluem a sua anotação como uma proteína ligadora de zinco e uma fosfoproteína. O splicing alternativo produz múltiplos isoformas, e mutações na CRBN estão associadas a deficiência intelectual autossómica recessiva.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde aos aminoácidos 1-280 da CRBN humana (proteína de comprimento total ~51 kDa). Para Western blotting, considere carregar 20-30 µg de lisado proteico; a banda esperada está aproximadamente a 51 kDa em condições redutoras.
• Este anticorpo é recomendado para WB, IHC-P, IF/ICC e ELISA. Para IHC-P, podem ser necessários métodos de recuperação de antigénio apropriados (por exemplo, tampão citrato mediado por calor, pH 6.0); valide em secções de tecido com expressão conhecida de CRBN (por exemplo, cérebro, botões dos membros).
• A reatividade cruzada com rato e rato foi confirmada, sugerindo conservação do epítopo entre espécies. Ao usar estas espécies, otimize as condições e confirme a reatividade no seu modelo experimental específico.
• Dado o papel da CRBN no sistema ubiquitina-proteassoma, o tratamento com inibidores do proteassoma (por exemplo, MG132) pode estabilizar as proteínas-alvo e afetar a deteção da CRBN em ensaios de degradação.

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