Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CRYAA para WB, IF-P, ELISA - P02489

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Cadeia Alfa-cristalina A

• A cadeia Alfa-cristalina A, também conhecida como proteína de choque térmico beta-4 (HspB4), é uma proteína estrutural principal da lente do olho dos vertebrados, contribuindo para a sua transparência e índice de refração.
  Referências relacionadas: PMID:18302245
• Na sua forma oxidada, atua como uma chaperona molecular, evitando a agregação de proteínas desnaturadas em várias condições de stress, uma função crítica para a manutenção da clareza da lente.
  Referências relacionadas: PMID:18199971, PMID:19595763, PMID:22120592
• O CRYAA é necessário para a formação adequada dos filamentos intermédios da lente como parte de um complexo com BFSP1 e BFSP2.
  Referências relacionadas: PMID:28935373
• É um membro da família das pequenas proteínas de choque térmico (sHSP) e é predominantemente expresso na lente do olho ao nível proteico.
• A localização subcelular inclui tanto o citoplasma como o núcleo.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação, oxidação e formação de ligações dissulfeto, que podem regular a sua atividade de chaperona.
• Mutações no CRYAA estão associadas à catarata autossómica dominante, destacando a sua importância na fisiologia da lente.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde à proteína CRYAA humana de comprimento total (aminoácidos 1-173), o que pode permitir um amplo reconhecimento das formas nativas e desnaturadas. Para o Western blot, deve ser detetada uma banda específica em torno de 20 kDa em amostras positivas; considere o uso de um controlo de proteína recombinante para verificação.
• A reatividade cruzada é confirmada com humano, camundongo, rato e peixe-zebra; portanto, o anticorpo é adequado para estudos entre espécies. No entanto, recomenda-se a validação no seu sistema modelo específico.
• Para imunofluorescência (IF-P), é provável que seja necessária a permeabilização de células ou secções de tecido para detetar o CRYAA citoplasmático e nuclear. Aconselha-se a otimização das condições de fixação e permeabilização.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou deteção de antígenio. O emparelhamento com um anticorpo secundário ou sistema de deteção correspondente deve ser otimizado empiricamente.
• Como o CRYAA pode existir em formas reduzidas e oxidadas em diferentes condições, considere as condições de preparação da amostra (por exemplo, redutor vs. não redutor) para investigar estados redox específicos.

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