Anticorpo Policloonal de Coelho Anti-CSRP3 - P50461

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CSRP3

• A CSRP3, também conhecida como proteína LIM cardíaca (CLP) ou proteína LIM muscular (MLP), é um membro da família de proteínas ricas em cisteína e glicina e contém dois domínios de ligação a zinco LIM, que facilitam as interações proteína-proteína.
• Atua como regulador positivo da miogênese, servindo como cofator para fatores de transcrição bHLH miogênicos (MYOD1, MYOG, MYF6), potencializando sua ligação ao DNA e promovendo a expressão de genes específicos do músculo.
• Em cardiomiócitos, desempenha um papel estrutural crucial ao organizar componentes citosólicos na linha Z, atuando como um scaffold que ancora a calcineurina e permite a detecção de estiramento mecânico e a sinalização calcineurina-NFAT ativada por estresse.
• Liga-se diretamente aos filamentos de actina, reticulando-os em feixes e protegendo contra a despolimerização mediada por cofilina. Também modula bidirecionalmente a atividade da CFL2, aumentando ou reduzindo a despolimerização da actina dependendo da razão CSRP3:CFL2.
  Referências relacionadas:
  PMID:19752190
  PMID:24934443
• In vitro, inibe a atividade da proteína quinase C alfa (PKC/PRKCA), sugerindo um papel na atenuação da sinalização excessiva de estresse cardíaco.
  Referências relacionadas:
  PMID:27353086
• Uma isoforma alternativa (isoforma 2) é detectada no músculo estriado, onde pode regular a organização precoce do sarcômero e influenciar negativamente a diferenciação das miotubos.
• Subcelularmente, se localiza no núcleo, citoplasma e linhas Z do sarcômero, o que é consistente com papéis duplos na regulação transcricional e organização do citoesqueleto.
• Fosforilação e coordenação de íons metálicos são modificações pós-traducionais previstas que provavelmente modulam sua atividade e interações.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende quase todo o comprimento da CSRP3 humana (aa 1-194), portanto espera-se que o anticorpo policloonal reconheça múltiplos epítopos e possa detectar ambas as isoformas.
• Para Western blotting, uma banda predominante em torno de 21 kDa deve aparecer em lisados de músculo cardíaco e esquelético de humano, camundongo ou rato; inclua controles positivos e negativos adequados.
• Na imunohistoquímica (IHC-P), teste técnicas padrão de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato pH 6,0) e otimize a diluição do anticorpo primário; devido à localização nuclear/citoplasmática, espera-se coloração em cardiomiócitos e miofibras de contração lenta.
• Para imunofluorescência/ICC, considere a co-coloração com marcadores sarcômeros (por exemplo, α-actinina) para verificar a localização na linha Z; o método de permeabilização pode influenciar a detecção.
• Aplicações de ELISA podem se beneficiar de uma etapa de bloqueio adaptada à matriz da amostra; formatos de antígeno revestido ou sanduíche podem ser explorados.
• Como com qualquer anticorpo policloonal, recomenda-se a validação entre lotes, e a reatividade cruzada entre espécies deve ser confirmada no sistema experimental específico.

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