Anticorpo Policlonais Anti-CTCF para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P49711

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CTCF

• CTCF é uma proteína de ligação ao DNA de dedo de zinco altamente conservada que atua como regulador arquitetônico chave da organização da cromatina e da expressão gênica (PubMed:16949368, PubMed:18347100, PubMed:18654629). Referências relacionadas: PMID:16949368 PMID:18347100 PMID:18654629
• Media a formação de alças de cromatina, ancora o DNA à lâmina nuclear e define limites entre domínios ativadores e heterocromáticos por ligação a isoladores de cromatina (PubMed:18347100, PubMed:18654629, PubMed:19322193). Referências relacionadas: PMID:18347100 PMID:18654629 PMID:19322193
• CTCF participa da expressão gênica alelo-específica no locus imprintado IGF2/H19 e regula a replicação assíncrona desse locus (PubMed:16107875, PubMed:16815976, PubMed:17827499). Referências relacionadas: PMID:16107875 PMID:16815976 PMID:17827499
• Interage preferencialmente com DNA não metilado, evitando a disseminação da metilação de CpG; sua ligação é inibida pela metilação de CpG, ligando assim a metilação do DNA à estrutura da cromatina (PubMed:18413740). Referências relacionadas: PMID:18413740
• Atua como repressor transcripcional nos promotores de MYC e BAG1, e como ativador de APP; também regula o agrupamento gênico APOA1/C3/A4/A5 e os genes de MHC classe II (PubMed:8649389, PubMed:9591631, PubMed:9407128, PubMed:18347100, PubMed:19322193). Referências relacionadas: PMID:8649389 PMID:9591631 PMID:9407128 PMID:18347100 PMID:19322193
• CTCF pode dimerizar, causando alterações locais na modificação de histonas (perda de acetilação, ganho de metilação) e é necessário para o posicionamento do nucleossomo, coesão das cromátides irmãs e localização da cohesina (PubMed:12191639, PubMed:18550811). Referências relacionadas: PMID:12191639 PMID:18550811
• Se localiza no núcleo, nucleoplasma, cromossomos e centrômeros; desempenha papel no recrutamento de CENPE para regiões pericentroméricas/centroméricas durante a mitose (PubMed:26321640). Referências relacionadas: PMID:26321640
• É amplamente expresso em tecidos humanos, ausente em espermatócitos primários; atua como supressor tumoral e está implicado em distúrbios do desenvolvimento (PubMed:12191639). Referências relacionadas: PMID:12191639

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-260) conservada em humano, camundongo e rato, este anticorpo pode apresentar reação cruzada com essas espécies; realize a validação em seus tipos de amostra específicos.
• Para imunofluorescência (IF/ICC) e imunohistoquímica (IHC-P), considere protocolos de permeabilização nuclear e recuperação de antígeno para aumentar o sinal.
• Na imunoprecipitação de cromatina (ChIP), o anticorpo almeja sítios de ligação abundantes de CTCF; otimize as condições de ligação cruzada e cisalhamento para capturar complexos proteína-DNA robustos.
• O tamanho esperado da banda em Western blotting é de aproximadamente 83 kDa; valide com controles adequados, pois modificações pós-traducionais podem alterar a migração.
• O ELISA pode ser usado para ensaios de ligação de alto rendimento; confira os tampões de revestimento e os sistemas de detecção ideais.

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