Anticorpo monoclonal de coelho anti-Cullin 2 (CUL2) para WB, IHC-P, ELISA - Q13617

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Cullin 2

• A Cullin-2 (CUL2) atua como uma proteína de suporte rígida em múltiplos complexos de ligases E3 de ubiquitina ECS baseados em cullina-RING (ElonginB/C-CUL2/5-SOCS-box), mediando a ubiquitinação de substratos e sua subsequente degradação proteassomal. Referências relacionadas: PMID:11384984, PMID:26138980, PMID:29775578

• A atividade do complexo ECS é rigorosamente regulada pela neddilação da cullina, que ativa a função da ligase E3, e pelo inibidor CAND1, que se liga à CUL2 desneddilada e impede o recrutamento espúrio de substratos. Referências relacionadas: PMID:12609982, PMID:24076655, PMID:27565346

• Entre os complexos ECS específicos para substratos, o ECS(VHL) tem como alvo o fator induzível por hipóxia (HIF) para ubiquitinação, desempenhando um papel crítico na detecção celular de oxigênio e na resposta à hipóxia. Referências relacionadas: PMID:10973499, PMID:9122164

• A Cullin-2 também é um componente-chave da via DesCEND (destruição via degrons C-terminais), na qual subunidades de reconhecimento de substratos, como KLHDC2, KLHDC3, KLHDC10, APPBP2, FEM1A, FEM1B ou FEM1C, reconhecem motivos C-terminais específicos nas proteínas-alvo, levando à sua degradação dependente de ubiquitina. Referências relacionadas: PMID:26138980, PMID:29775578, PMID:29779948

• Os complexos ECS e a ligase de ubiquitina ARIH1 colaboram em um mecanismo tandem para mediar a ubiquitinação eficiente de substratos. Referências relacionadas: PMID:27565346

• A CUL2 localiza-se predominantemente no núcleo, em consonância com seu papel na regulação da estabilidade de proteínas nucleares e na renovação de fatores de transcrição.

• As modificações pós-traducionais da Cullin-2 incluem neddilação, fosforilação e acetilação; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e ela participa de interações entre hospedeiro e vírus.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-100) da Cullin 2 humana, uma área provavelmente exposta tanto nas conformações nativa quanto desnaturada. Considere usar este anticorpo em Western blotting sob condições redutoras, com uma banda esperada de 87–89 kDa.
• Devido à reatividade cruzada com camundongo e rato, valide a especificidade do anticorpo nessas espécies por meio de knockdown com siRNA ou controles de knockout.
• Para imunohistoquímica (cortes de parafina), a recuperação antigênica utilizando tampão citrato (pH 6,0) ou tampão EDTA (pH 9,0) pode melhorar a coloração nuclear.
• O desempenho ideal no ELISA depende do antígeno de revestimento adequado e da titulação do anticorpo; inclua uma curva padrão com proteína CUL2 recombinante, se disponível.
• A combinação deste anticorpo com outros anticorpos da família Cullin pode ajudar a caracterizar complexos específicos de ligases E3 em aplicações de imunoprecipitação.

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